С какой целью проводится проба Кумбса? Особенности проведения прямой пробы кумбса и расшифровка полученных результатов

Проба Кумбса - это специфический лабораторный тест, который позволяет определить антитела, находящиеся в или на поверхности эритроцита. Данная процедура позволяет диагностировать иммунную в том числе у новорожденных, а также выявить гемолитические трансфузионные реакции. Проба Кумбса активно применяется в судебной медицине и научной генетике с целью определения эритроцитарных антигенов. Соблюдение всех правил осуществления такого анализа позволяет получить максимально достоверный результат.

Цель антиглобулинового теста

Проба Кумбса прямая позволяет обнаружить антиэритроцитарные антитела, которые фиксируются на эритроцитах. Положительная реакция при подобном исследовании указывает на развитие аутоиммунной Следует отметить, что отрицательный результат не исключает наличия поскольку антитела нередко находятся в свободном виде, то есть не имеют связи с эритроцитами. В таких случаях целесообразно провести непрямую пробу Кумбса, которая позволит определить автономные вещества в

Как проводится анализ?

абор венозной крови у пациента осуществляют утром натощак, несмотря на то, что каких-либо существенных факторов, влияющих на конечный результат подобного теста, не обнаружено. Хранить взятый материал разрешается при температуре от 2 до 8 °С не дольше семи дней. Для того чтобы показатели данного исследования были максимально точны, цельную кровь в течение первых двух часов необходимо доставить в лабораторию. В идеале проба Кумбса должна показывать отрицательный результат, что указывает на отсутствие гемолитических изменений в организме.

Расшифровка итоговых показателей

Проба Кумбса является достаточно трудоемким методом исследования, который требует тщательного и точного выполнения. При использовании такого теста могут встречаться некоторые сложности, которые связаны с неправильной интерпретацией окончательных результатов по причине слабого проявления положительных реакций. Следует отметить, что недостоверность анализа - а именно положительная проба Кумбса - может стать следствием неэффективной отмывки эритроцитов, контакта с жирной
поверхностью, а также нейтрализации антиглобулиновых реагентов компонентами

сыворотки. Еще одним недостатком такого метода исследования является нестойкость взятого материала, хранение которого имеет определенные особенности.

Причиной ложноотрицательного результата может стать чрезмерное встряхивание взвеси эритроцитов при ресуспендировании. Ошибочные результаты могут быть также обусловлены присутствием примесей антикомплементарных антител, которые адсорбируются при инкубации на поверхности тестируемых эритроцитов, в результате чего создается видимость положительного результата. Если тщательно отмывать исследуемые образцы и контролировать условия проведения реакции, указанные недостатки могут быть легко устранены, что повысит шансы на получение максимально достоверных показателей пробы Кумбса.

Кровь представляет из себя жидкую ткань, в которую включаются: тромбоциты, лейкоциты, эритроциты и плазма. Выполняя основные жизненные функции, кровь играет значимую роль в функционировании человеческого организма и часто используется в медицинских целях. Например, в случаях большой кровопотери появляется потребность в трансфузии крови реципиенту от донора.

Выявление группы крови перед трансфузией

Сегодняшние изосерологические исследования дают возможность производить типирование крови по антигенам эритроцитов. Для этого обязательно производятся анализы на определение совместимости крови реципиента и донора, а также анализы на определение группы крови по системе АВ0 и другие анализы, в частности реакция Кумбса.

Для уменьшения риска для жизни больного производят типирование крови, потому как даже с одинаковыми группами крови, донор и реципиент могут не совпадать по иным параметрам. После определения резус-фактора и группы крови, делается анализ на совместимость - рецепиент и донор совместимы, если при анализе не случается гемолиза (разрушения эритроцитов) или агглютинации (склеивания эритроцитов).

Уменьшить угрозу для жизни больного позволяет как раз типирование крови. Помимо определения группы крови и резус-фактора, перед трансфузией проводится множество других необходимых лабораторных анализов. Определение группы крови - это основной анализ, который производится перед любым медицинским вмешательством, у новорожденных, во время беременности.

Реакция Кумбса

Для выявления гемолитической болезни у новорожденных детей и выявления антител к резус-фактору у беременных женщин осуществляется реакция Кумбса. Данный тест имеет важное значение, так как резус-несовместимость ребенка и матери может привести к гемолитическому заболеванию новорожденного, а при раннем проявлении явиться причиной преждевременных родов.

Прямая и непрямая реакция Кумбса

Тест Кумбса протекает в 1 либо 2 этапа, в зависимости непрямой он или прямой. В случае проведения прямой реакции Кумбса к сыворотке крови добавляется антиглобулиновая сыворотка, при условии, что антитела были зафиксированы на поверхности эритроцитов, и происходит агглютинация эритроцитов.

Непрямой тест Кумбса проводится в случае, когда в плазме крови антитела располагаются в свободном состоянии. Изначально надо зафиксировать антитела на эритроцитах, для этого инкубируют эритроциты и сыворотку крови. Затем добавляют антиглобулиновую сыворотку.

Антиглобулиновая сыворотка

Для реакции Кумбса применяется антиглобулиновая сыворотка - реагент, который имеет антитела к иммуноглобулинам человека. Антиглобулиновую сыворотку еще применяют в генетике, судебной медицине, акушерстве и прочих медицинских сферах.

Выявление резус-принадлежности, определение иммунных антител системы АВ0, аллоиммунных антиэритроцитарных антител - это даже не весь перечень возможностей применения антиглобулиновой сыворотки в сфере медицины.

Проба Кумбса является методом лабораторного исследования, сделанного путем воздействия на гемагглютинацию. В ее основании лежит восприимчивость антител к иммуноглобулинам и элементам фермента, а также их способность агглютинировать эритроциты, покрытые C3 либо Lg.

Прямая диагностика Кумбса

Используется для обнаружения антител или составляющих комплемента, установленных с наружной части клеток. Прямая проба Кумбса выполняется следующими действиями.

Применение такой пробы

Прямую диагностику Кумбса используют в определенных случаях, таких, как:

трансфузионные воздействия;
аутоиммунный гемолиз;
медикаментозная гемолитическая анемия.

Непрямая проба Кумбса

Данная диагностика дает возможность выявить антитела к клеткам в сыворотке, которую инкубируют, как правило, с донорскими эритроцитами типа 0, а потом осуществляют прямую пробу. Применяют непрямую диагностику Кумбса в следующих случаях:

Как готовиться к анализу

Существуют некоторые правила подготовки к обследованию.

Если пациент является новорожденным, родителям нужно знать, что исследование будет способствовать диагностированию ГЗН (гемолитическому заболеванию новорожденных).
В случае если у больного есть подозрения гемолитического малокровия, ему должны объяснить, что анализ позволит узнать, вызвано ли оно защитными расстройствами, приемами лекарств либо другими факторами.
Проба Кумбса прямая и непрямая не делает никаких ограничений в режиме питания или диете.
Необходимо уведомить пациента, что для обследования потребуется взять кровь из вены, а также сказать ему, когда именно будет производиться венепункция.
Еще следует предупредить о вероятности неприятных ощущений в период наложения повязки на руку и самой процедуры.
Препараты, которые способны подействовать на результат образца, нужно отменить.

К таким лекарствам относятся:

«Стрептомицин»;
«Метилдофа»;
«Прокаинамид»;
сульфаниламиды;
«Мелфалан»;
«Хинидин»;
«Рифампин»;
«Изониазид»;
цефалоспорины;
«Гидралазин»;
«Хлорпромазин»;
«Леводопа»;
«Тетрациклин»;
«Дифенилгидантоин»;
«Этосуксимид»;
«Пенициллин»;
мефенаминовая кислота.

Забор крови совершают с утра натощак.

Как проводится мероприятие

Проба Кумбса осуществляется в таком порядке:

При выполнении диагностики у взрослого больного после венепункции берут кровь в трубочки с ЭДТА (этилендиаминтетраацетатом).
У новорожденного производят забор крови из пуповины в мензурку с ЭДТА.
Зону прокола прижимают ватным тампоном до прекращения кровотечения.
При появлении синяка в месте венепункции прописывают согревающие компрессы.
После набора крови пациенту разрешается вернуться к приему отменных препаратов.
Необходимо сообщить родителям новорожденного, что для наблюдения за динамикой анемии может потребоваться вторичный анализ.

Преимущества пробы Кумбса

Такое исследование имеет некоторые превосходства, а именно:

Минусы анализа

Проба Кумбса положительная является достаточно трудоемким методом осмотра, предполагающим характерную точность выполнения. При ее использовании можно столкнуться с определенными трудностями, связанными в особенности с интерпретацией слабоположительных воздействий.

Установлено, что ошибочные отрицательные либо слабоположительные реакции при производстве проб Кумбса могут стать последствиями неудовлетворительно активной отмывки клеток, ослабления антиглобулинового реагента остатками сыворотки, а также соединения с необезжиренной наружностью, на которой может закрепляться антиглобулин, утрачивая при этом свою действенность.

Проба Кумбса отличается еще одним недостатком - малостойкостью антиглобулинового реагента, приобретение и сохранение которого имеют индивидуальные особенности, что аналогично делает сложной численную оценку воздействия антиглобулиновой сыворотки на гемагглютинацию.

Болезни, которые можно обнаружить при исследовании

Диагностика Кумбса дает возможность обнаружить некоторые виды заболеваний, такие, как:

гемолитическое недомогание новорожденных;
различные трансфузионные реакции;
аутоиммунный гемолиз;
лекарственное гемолитическое малокровие.

На сегодняшний день проба Кумбса считается довольно популярной системой исследования крови как у взрослого человека, так и у новорожденного. Она дает возможность выявить множество различных болезней.

Утверждено приказом Росздравнадзора

по применению «Набора реагентов для определения антигенов и антител системы Резус крови человека»
(АГС для пробы Кумбса)

ТУ 9398-102-51203590-2012

РУ № РЗН 2013/1255 от 11.10.2013

I. ВВЕДЕНИЕ

Стандартная сыворотка для пробы Кумбса содержит специфические гетероиммунные антитела против белка крови человека и предназначена для использования в двух вариантах реакции – прямой и непрямой пробе Кумбса.

Прямая проба Кумбса применяется для определения сенсибилизации эритроцитов in vivo при гемолитической болезни новорожденнных и у больных с аутоиммунной формой хронической гемолитической анемии а также при некоторых других состояниях. Проведение прямой пробы Кумбса заключается в том, что к исследуемым эритроцитам, предварительно отмытым от белков собственной плазмы, добавляется сыворотка для пробы Кумбса. Если эритроциты были сенсибилизированы in vivo, то в результате реакции происходит их агглютинация.

Непрямая проба Кумбса применяется как проба для выявления состояния сенсибилизации организма, позволяющая выявлять антитела, находящиеся в свободном состоянии в сыворотке крови исследуемого лица; как проба на совместимость переливаемой крови, когда исследуется воздействие сыворотки реципиента на эритроциты предполагаемого донора; и как проба для определения различных групповых антигенов в эритроцитах при помощи предварительного воздействия на них стандартных сывороток, содержащих антитела заведомо известной специфичности. Непрямая проба Кумбса (все варианты) производится в два этапа, первым из которых является инкубация исследуемой (или стандартной) сыворотки со стандартными (или исследуемыми) эритроцитами, т. е. сенсибизация эритроцитов in vitro. Второй этап – собственно реакция с сывороткой для пробы Кумбса, которая производится так же, как прямая проба Кумбса.

Конечный результат реакции как в прямой, так и в непрямой пробе Кумбса происходит за счет взаимодействия стандартной сыворотки для пробы Кумбса, с антителами (белком крови человека), фиксированными на эритроцитах. Этот результат проявляется в виде агглютинации эритроцитов. Для наблюдения за агглютинацией следует использовать белую фарфоровую или любую белую пластинку обязательно со смачиваемой поверхностью для того, чтобы наносимые на нее капли хорошо размешивались и не растекались по поверхности пластинки. Перемешанные капли следует слегка размазать по пластинке, приблизительно до размера 2-х копеечной монеты.
II. ПОДГОТОВКА ИНГРЕДИЕНТОВ РЕАКЦИИ

Исследуемую сыворотку для определения в ней наличия и специфичности антител получают из крови обследуемого лица без добавления консерванта. Хранят при температуре + 4–8 0 С не более 2 суток или в замороженном состоянии – срок 1 месяц.

Сыворотку для пробы на совместимость получают таким же способом, но используют со сроком хранения не более 2 суток.

Эритроциты, предназначенные для определения в них тех или иных изоантигенов, заготавливаются с каким-либо консервантом от лица, кровь которого исследуется. Можно также использовать осадок эритроцитов из крови, взятой без консерванта.

При пробе на совместимость используется кровь донора, спущенная через иглу из флакона, приготовленного для переливания.

Во всех случаях эритроциты 3-4 раза отмываются в пробирках от плазмы, путем добавления к одному объему эритроцитов 8-10 объемов изотонического раствора хлорида натрия, с последующим перемешиванием и центрифугированием при 1500-2000 об/мин в течение 5-10 мин (до полного осаждения эритроцитов). После каждого центрифугирования надстой отсасывается.
III. ТЕХНИКА ПРОВЕДЕНИЯ РЕАКЦИЙ

Испытуемые эритроциты готовят в виде 5% взвеси, для чего одну каплю четырежды отмытых эритроцитов смешивают в пробирке с 19 каплями изотонического раствора хлорида натрия.

Одну каплю (0,05 мл) 5% взвеси эритроцитов переносят на белую пластинку и размазывают. Пластинку покачивают и в течение 3-х минут наблюдают, не наступила ли агглютинация эритроцитов. Если агглютинация не наступила, то сюда же добавляют 1-2 капли стандартной сыворотки для пробы Кумбса, капли тщательно перемешивают, после чего пластинку слегка покачивают, затем на одну-две минуты оставляют в покое и снова покачивают. Одновременно в течение 10 минут ведут наблюдение за результатом, который выражается в наличии или отсутствии агглютинации.
Трактовка результатов прямой пробы Кумбса.

Отсутствие агглютинации – отрицательная проба

Наличие агглютинации – положительная проба, что указывает на сенсибилизацию исследуемых эритроцитов, т. е. на абсорбцию на них антител, происшедшую in vivo в организме человека (новорожденного, больного). Если агглютинация исследуемых эритроцитов наступила до добавления к ним сыворотки для пробы Кумбса, результат прямой пробы не учитывается.
2. Непрямая проба Кумбса

Предназначенная для выявления изоантител в сыворотке крови обследуемого лица

Применяется в тех случаях, когда необходимо выяснить, содержатся ли в крови больного, беременной женщины, донора и т. д. изоиммунные антитела неполной формы и установить их специфичность. Для реакции используют сыворотку крови обследуемого лица и стандартные эритроциты заведомо известной специфичности. Среди этих 8-10 или более образцов эритроцитов должны быть различия по факторам других систем и очень важно, чтобы каждый из этих факторов содержался хоты бы в одном образце эритроцитов. Также в панель включаются образцы резус-отрицательных эритроцитов с различными сочетаниями антигенов других систем, так, чтобы среди них имелись Даффи-положительные и Даффи-отрицательные, которые, в свою очередь, делились бы на Келл-положительные и Келл-отрицательные, Кидд-положительные и Кидд-отрицательные и т. д. В качестве отрицательного контроля в реакцию по возможности включают эритроциты того лица, сыворотка которого исследуется.

Техника реакции

В штатив устанавливают ряд центрифужных или других пробирок объемом 3-10 мл, по числу образцов эритроцитов, включенных в реакцию. Пробирки маркируют и, согласно маркировке, вносят в них по 1 маленькой капле (0,01 мл) отмытых стандартных эритроцитов. В каждую пробирку накапывают три капли исследуемой сыворотки, пробирки сильно встряхивают для перемешивания эритроцитов с сывороткой и помещают в термостат при 37 0 С на 45 мин. После инкубации пробирки вынимают из термостата, и эритроциты отмывают путем добавления до верха пробирки изотонического раствора хлорида натрия, перемешивания и последующего центрифугирования. Отмывание повторяют 3-4 раза, каждый раз тщательно отсасывая надстой, затем к отмытым эритроцитам добавляют 2 капли изотонического раствора хлорида натрия для получения приблизительно 5% взвеси (при использовании центрифужных пробирок можно ограничиться двухкратным отмыванием).

1 каплю 5% взвеси эритроцитов из каждой пробирки переносят на белую пластинку, добавляют туда 1-2 капли стандартной сыворотки для пробы Кумбса и тщательно перемешивают сыворотку с эритроцитами. Пластинку слегка покачивают, затем на 1-2 минуты оставляют в покое и снова периодически покачивают, одновременно наблюдая за результатом реакции в течение 20 минут.

Трактовка результатов

Отсутствие признаков агглютинации (отрицательный результат) во всех образцах значит, что в исследуемой сыворотке не содержится неполных антител к групповым антигенам, которые содержатся в стандартных эритроцитах, включенных в исследование.

Если в некоторых или в большинстве капель, кроме контроля, наблюдается агглютинация , это значит, что в исследуемой сыворотке содержатся неполные антитела против антигенов эритроцитов. Вопрос о специфичности этих антител решается по сопоставлению положительных и отрицательных реакций с антигенной структурой эритроцитов, включенных в реакцию. Вопрос об активности этих антител решается титрованием.

Пример 1. Агглютинация имела место со всеми образцами эритроцитов, содержащими фактор Rh 0 (D), независимо от наличия и от отсутствия других факторов этой системы и других систем, в то время, как со всеми Rh 0 (D) – отрицательными образцами агглютинации не наблюдалось (так же независимо от наличия или отсутствия других факторов) – это значит, что в исследуемой сыворотке содержатся неполные антитела анти-резус – Rh 0 (D).

Пример 2 . Агглютинация имела место со всеми образцами эритроцитов, содержацими фактор Даффи, независимо от наличия или отсутствия антигенов системы резус и других систем, в то время, как со всеми Даффи-отрицательными образцами агглютинации не наблюдалось, это значит, что в исследуемой сыворотке содержатся неполные антитела анти-Даффи.

Дополнение. В случае, если в учреждении не имеется полной панели стандартных эритроцитов, но есть необходимость в исследовании сыворотки на наличие антител, рекомендуется провести исследование с 25-30 произвольно взятыми образцами эритроцитов здоровых лиц группы 0 (I) или одноименной с исследуемой сывороткой. Это даст возможность решить вопрос о наличии или отсутствии антител к большинству антигенов системы Rh-Hr, Даффи, Келл, Кидд.

При получении положительного результата дальнейшее заключение о специфичности выявленных антител может быть решено при специальном исследовании с полной панелью стандартных эритроцитов.

3. Техника проведения непрямой пробы Кумбса, как пробы на совместимость переливаемой крови

Для предупреждения несовместимости при переливании крови, перед трансфузией обязательно должны быть произведены следующие пробы на совместимость:

Проба на совместимость по группам крови АВО, которая производится на плоскости при комнатной температуре.
Пробы на совместимость по резус-фактору и другим изоантигенам.

Несовместимость по резус-фактору и по некоторым другим изоантигенам может зависеть как от наличия полных антител (определяемых в солевой среде при 37 0 С в пробирках) так и, чаще всего, от неполных антител, для чего наиболее чувствительной является непрямая проба Кумбса.

Одну маленькую (0,01 мл) каплю отмытых эритроцитов донора, взятых через иглу из флакона с кровью, предназначенной для переливания, переносят на дно центрифужной или другой пробирки объемом 3-4 мл и добавляют в нее 3 капли сыворотки больного. Пробирку встряхивают для перемешивания эритроцитов с сывороткой, после чего помещают в термостат при 37 0 С на 45 мин. После инкубации добавляют в пробирку доверху изотонический раствор хлорида натрия, содержимое пробирки перемешивают и центрифугируют 5-10 мин. Такое отмывание эритроцитов повторяют 3 раза, каждый раз тщательно удаляя надстой. При использовании центрифужных пробирок можно ограничиться двухкратным отмыванием. К отмытым эритроцитам добавляют 2 капли изотонического раствора хлорида натрия для получения приблизительно 5% взвеси.

1 каплю 5% взвеси эритроцитов переносят на белую пластинку, добавляют туда 1-2 капли стандартной сыворотки для пробы Кумбса и тщательно перемешивают сыворотку с эритроцитами. Затем пластинку слегка покачивают, на 1-2 минуты оставляют в покое и снова периодически покачивают, одновременно наблюдая результат в течение 20 минут.

Примечание: При несовместимости по резус-фактору агглютинация обычно наступает в течение первой минуты, однако при низком титре резус-антител (или других антител) агглютинация может наступить позже, иногда к двадцатой минуте.
Трактовка результата:

Агглютинаты видны в виде комочков на просветленном или полностью обесцвеченном фоне – это значит, что кровь донора несовместима с кровью реципиента и не может быть ему перелита.

Отсутствие признаков агглютинации означает, что кровь больного не содержит неполных антител к эритроцитам донора в отношении резус-фактора и других изоантигенов, к которым могли образоваться антитела неполной формы.

Непрямая проба Кумбса является чувствительной только в отношении неполных антител.
4. Техника непрямой проба Кумбса для определения антигенной структуры эритроцитов

Данная проба используется для определения наличия или отсутствия какого-либо группового антигена эритроцитов при помощи стандартной сыворотки, содержащей соответствующие антитела в неполной форме.

Наиболее часто непрямая проба Кумбса используется при определении антигенов Келл (К), Даффи (Fy), Кидд (Jk), и также для определения слабого антигена системы резус (Du).

Прежде, чем приступить к определению антигенов, исследуемые эритроциты следует проверить в прямой пробе Кумбса. При положительном результате прямой пробы – определение антигенов непрямой пробой Кумбса провести нельзя и для этой цели нужно применить другие реакции.

Для реакции используют центрифужние или другие пробирки объемом 3-4 мл в количестве трех: одну – для исследуемого образца эритроцитов и две для На дно первой пробирки вносят 1 маленькую (0,01 мл) каплю трижды отмытых испытуемых эритроцитов, во вторую - контрольные эритроциты, содержащие искомый антиген (например, Даффи- положительные) и в третью пробирку – отрицательный контроль (Даффи – отрицательные). Во все пробирки добавляют по 2-3 капли стандартной сыворотки (в данном примере анти-Даффи). Пробирки встряхивают для перемешивания содержимого и помещают в термостат при 37 0 С на 45 мин. После такой инкубации пробирки вынимают из термостата, доливают в них доверху изотонический раствор хлорида натрия, тщательно перемешивают содержимое и центрифугируют при1500-2000 тыс. об/мин в течение 5-10 мин. После центрифугирования надстой тщательно отсасывают и такое отмывание эритроцитов повторяют 4 раза. (При использовании центрифужных пробирок можно ограничиться двухкратным отмыванием).

К отмытым эритроцитам добавляют 2 капли изотонического раствора хлорида натрия для получения приблизительно 5% взвеси. 1 каплю 5% взвеси эритроцитов из каждой пробирки переносят на белую пластинку, к каждой капле эритроцитов добавляют 1-2 капли стандартной сыворотки для пробы Кумбса и перемешивают. Пластинку слегка покачивают, затем на 1-2 минуты оставляют в покое и снова периодически покачивают, одновременно наблюдая за ходом реакции в течение 20 минут.
Трактовка результатов

Наличие агглютинации эритроцитов (положительный результат) означает, что кровь содержит искомый антиген (в данном примере – кровь Даффи-положительная).

Отсутствие агглютинаци (отрицательный результат) означает, что исследуемая кровь не содержит искомого антигена (Даффи-отрицательная).

Результат учитывается как истиный после проверки контрольных образцов, т. е. в примере при положительном результате с Даффи-положительным образцом и отрицательном – с Даффи-отрицательным образцом.

5. Форма выпуска

Реактив выпускается в жидкой форме во флаконах объемом 5 или 10 мл (1 мл содержит 10 доз). В качестве консерванта применяется азид натрия в конечной концентрации 0,1%.

6.Хранение

Срок хранения - два года в холодильнике при 2-8°С. Вскрытый флакон годен к использованию при хранении в холодильнике в герметично закрытом виде в течение всего срока годности.

Основаниями для рекламации являются: отсутствие активности, неспецифичность, нарушение целостности флакона, наличие хлопьев, истекший срок годности реагента. При составлении рекламации просим указать дату получения, поставщика (если Вы получили товар не от производителя), номер серии, причины, по которым реагент признан негодным. Просим приложить протокол с результатами проверки реагента и 2-3 невскрытых флакона с реактивом
Рекламацию следует направить на предприятие-изготовитель ООО «МЕДИКЛОН»: 127276

Проба Кумбса – это клинический анализ крови, который проводится, чтобы выявить, содержит ли кровь определенные антитела, которые могут быть небезопасны. Эти антитела приклеиваются к эритроцитам и могут вторгнуться в иммунную систему, а также нанести вред другими способами. В медицинской терминологии это исследование также называют антиглобулиновым тестом (АГТ).

Типы проб Кумбса

Существует два типа проб Кумбса – прямой и непрямой.

Прямая проба Кумбса , также известная как прямой (ПАТ), выявляет ауто-антитела, которые прикрепляются к поверхности эритроцитов. Эти антитела иногда производятся в организме вследствие определенных заболеваний или при приеме определенных медикаментов, таких как прокаинамид, метилдопа или хинидин.

Данные антитела опасны, потому что иногда они вызывают анемию, разрушая эритроциты.

Данный тест иногда назначается для диагностики причины желтухи или анемии.

В норме реакция Кумбса отрицательная.

Положительно при:

гемолитической болезни новорожденных;
аутоиммунном гемолизе;
гемолитических трансфузионных реакциях;
лекарственной иммунной гемолитической анемии.

Непрямая проба Кумбса , также известная как , используется для обнаружения антител к эритроцитам, содержащимся в сыворотке крови (сыворотка – это прозрачная желтая жидкость крови, которая остается после того, как выводятся красные кровяные тельца и коагулянт).

Непрямая проба Кумбса применяется при переливании крови для определения того, совпадает ли кровь донора с кровью реципиента. Это называется пробой на совместимость, она помогает предотвратить любую неблагоприятную реакцию на кровь донора. Данный анализ также рекомендован беременным женщинам. Некоторые женщины имеют антитела класса IgG, которые могут проникать через плаценту в кровь плода и нанести вред новорожденному, вызвав гемолитическое заболевание, известное как гемолитическая анемия.

Процедура

Кровь берется посредством шприца из вены, обычно с тыльной стороны ладони или на сгибе локтя. Место прокола пред этим тщательно дезинфицируется, а после взятия анализа крови накладывается чистая марля или вата.

Полученная кровь очищается в лаборатории, при этом отделяются красные кровяные тельца. Образец затем последовательно исследуется с применением различных реагентов сыворотки и Кумбса, который противопоставляется . Если не случается агглютинации (слипания красных кровяных телец), это означает положительный результат.

Однако если тест отрицательный, это означает, что в крови имеются антитела, которые действуют против эритроцитов. Это может указывать на различные заболевания, такие как анемия (как естественная, так и спровоцированная приемом медикаментов), сифилис, или микоплазменная инфекция. После получения результатов лечащий врач назначит соответствующее лечение.