Владельцы патента RU 2549433:

Изобретение относится к способу лечения млекопитающего с эндометриозом. Указанный способ включает импульсное или прерывистое пероральное введение в течение 3-5 последовательных суток с последующими 2-4 сутками перерыва или в течение 1-3 последовательных суток с последующими 1-2 сутками перерыва фармацевтической композиции, содержащей N-ацетил-L-цистеин, в течение периода времени по меньшей мере два месяца. N-ацетил-L-цистеин в указанном способе вводят в дозе, составляющей от 20 до 90 мг/кг/сутки. Заявленный способ обеспечивает более значительный эффект в отношении симптомов эндометриоза по сравнению с традиционным ежесуточным введением N-ацетил-L-цистеина. 10 з.п. ф-лы, 7 ил., 2 табл., 3 пр.

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей N-ацетил-L-цистеин, полезной в лечении эндометриоза и показаний, ассоциированных с эндометриозом.

Эндометриоз представляет собой третью лидирующую причину гинекологической госпитализации в Соединенных Штатах, и поражающую приблизительно 14 миллионов женщин в Европе. Широко используемые показатели заболеваемости эндометриозом включают 5-10% всех женщин репродуктивного возраста и 30-40% всех женщин с проблемой бесплодия. Он представляет собой заболевание, характеризующееся присутствием вне полости матки ткани, которая является гистологически идентичной эндометрию, то есть мембране, выстилающей внутреннюю часть матки млекопитающего. Эта аномально расположенная ткань развивается в новообразования или поражения (также называемые имплантатами или узелковыми утолщениями), которые реагируют на менструальный цикл так же, как эндометриальная ткань матки: каждый месяц ткань нарастает, разрушается и отторгается. В то время как менструальная кровь вытекает из матки, кровь и ткань, отторгнутая от эндометриальных новообразований, не имеет пути для вытекания. Это приводит к внутреннему кровотечению, отрыву кровеносных сосудов и ткани от поражений и последующему хроническому воспалению.

Двумя наиболее распространенными симптомами эндометриоза являются боль и бесплодие. Симптомы могут включать: дисменорею, то есть боль до или после менструальных периодов, а также боль во время или после секса; тазовую хроническую боль или боль нижней части спины и кишечника; тяжелые менструальные периоды или кровянистые выделения и кровотечение между периодами; болезненную дефекацию или болезненное мочеиспускание во время менструальных периодов; бесплодие.

Причина эндометриоза в настоящее время неизвестна, и было предложено несколько теорий для обоснования эктопической миграции и имплантации эндометриальных клеток. Последние данные устанавливают связь между возникновением эндометриоза и измененным состоянием ткани своего происхождения: эутопического эндометрия. В данной области укрепляется уверенность, что неконтролируемая миграция, имплантация и рост эндометриом возникают от расстройств в эутопических эндометриальных клетках.

В настоящее время не существует лечения эндометриоза. Существует множество вариантов лечения, и существуют способы минимизации симптомов, вызванных этим состоянием. За исключением применения анальгетиков для лечения боли, лечение эндометриоза главным образом связано с подавлением функции яичников в секреции эстрогенов, и вследствие этого гормональных лечений различных субъектов, вплоть до индукции менопаузы в наиболее тяжелых случаях. хирургию используют для удаления эндометриом, спаек, перитональных имплантатов и глубоких поражений, локализованных в ректовагинальной перегородке или в других местах (т.е. в мочевом пузыре, кишечнике), и для ослабления боли. Однако рецидивы возникают как после терапевтического, так и после хирургического лечения. Молодые женщины с эндометриозом часто встают перед трудными решениями относительно их будущей репродукции. Гормональное лечение, предназначенное для подавления функции яичников, несовместимо с беременностью.

N-ацетил-L-цистеин (ниже упоминаемый как NAC) представляет собой хорошо известное лекарственное средство, которое использовали главным образом в качестве муколитического агента и в лечении отравления парацетамолом. В последние годы он также был признан обладающим другими полезными свойствами, такими как противовоспалительное и антипролиферативное действие, и был предложен для лечения ряда различных расстройств и симптомов, таких как шизофрения, диабет и рак.

В предшествующих исследованиях, изучающих молекулярные механизмы, лежащие в основе эндометриоза и связанные с ним, предполагалось, что возросшие скорости клеточной пролиферации при эндометриозе могут быть индуцированы окислительным стрессом в эндометриоидной ткани, вызванным свободными радикалами или ROS (reactive oxygen species - активными формами кислорода). Таким образом, предполагалось, что новые терапевтические стратегии для эндометриоза могут быть основаны на антиоксидантах и акцепторах ROS, таких как NAC.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Charlotte Ngo et al. предположили (The American Journal of Pathology (2009), Vol.175, No.I, pages 225-234), что окислительный стресс может индуцировать или усиливать пролиферацию эндометриоидных клеток при эндометриозе. Поэтому для лечения эндометриоза были предложены антиоксиданты, такие как NAC. Исследования на первичных клеточных линиях пациентов с эндометриозом, а также на мышиной модели с имплантированной эндометриоидной тканью человеческого происхождения показали, что NAC аннулировал признаки окислительного стресса, а также повышенную пролиферацию в соответствующих моделях. Таким образом, предполагалось, что антиоксиданты, такие как NAC, можно применять в качестве безопасного и эффективного лечения эндометриоза.

Nastaran Foyouzi et al. также предложили (Fertility and Sterility (2004), Vol.82, Suppl. 3, pages 1019-1022), что антиоксиданты, такие как NAC, можно применять для лечения эндометриоза. В статье описано исследование in vitro, где клетки, выделенные из здоровых субъектов, а также пациентов с эндометриозом, обрабатывали другим антиоксидантом, например NAC. Все антиоксиданты ингибировали пролиферацию эндометриальных стромальных клеток.

В исследованиях Yan Wo and Sun-Wei Guo (Gynecologic and Obstetric Investigation (2006), Vol.62, No. 4, pages 193-205; European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology, (2008), Vol.137, pages 198-203); патентной заявке US 2007/0287676 A1) исследовали влияние NAC на пролиферацию и остановку клеточного цикла в бессмертных эндометриальных стромальных клетках человека и сравнивали с другими агентами, предложенными для лечения эндометриоза. Было показано, что NAC оказывает влияние как на пролиферацию, так и на остановку клеточного цикла, хотя не так выражено, как ингибиторы гистондеацетилазы.

В исследовании S. Estany et al. (Journal of reproductive Immunology (2007), Vol.75, pages 1-10) было показано, что антиоксидантная активность NAC и других антиокислительных агентов в отношении эндометриальных клеток в культуре улучшала жизнеспособность окисленных клеток путем предотвращения клеточной цитотоксичности, индуцированной Н 2 О 2 .

Другой родственный уровень техники включает US 2003/0190381 А1, WO 2004/096206 А2, US 6239137 В1, US 2003/0119875 А1, US 2004/0014672 А1 и WO 2005/048822 А2.

Другой предшествующий уровень техники, описывающий молекулярное действие NAC в лечении рака, включает Т. Parasassi, et. al. (Cell Death and Differentiation (2005), Vol.12, No. 10, pages 1285-1296); E. K. Krasnowska et. al. (Free Radicals Biology and Medicine 2008, 45(11): 1566-72) и A.C. Gustafsson et. al. (BMC Cancer (2005), 5:75).

ЦЕЛИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Клинический результат лечения NAC при эндометриозе, по сведениям авторов изобретения, не был определен в известном уровне техники, также не была предложена эффективная схема приема для лечения эндометриоза или применение NAC для лечения показаний, ассоциированных с эндометриозом.

Поэтому главной целью настоящего изобретения является предложить решение проблемы получения фармацевтической композиции, содержащей N-ацетил-L-цистеин (NAC), для лечения эндометриоза и показаний, ассоциированных с эндометриозом, у людей и млекопитающих. Одним из аспектов этой цели является предложение фармацевтической композиции, содержащей N-ацетил-L-цистеин (NAC), для применения в эффективной схеме приема для лечения эндометриоза и симптомов, связанных с эндометриозом, у млекопитающих, включая людей.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Предполагалось, что NAC можно использовать в новых терапевтических стратегиях для эндометриоза на основании его применения в качестве антиоксиданта и акцептора ROS. Авторы настоящего описания показывают, что NAC индуцирует молекулярные и клеточные изменения, которые не только ингибируют пролиферацию, но также индуцирует дифференциацию больной ткани по отношению к нормальной ткани.

Эти сведения привели авторов настоящего изобретения к предложению нового назначения NAC в лечении эндометриоза и показаний, ассоциированных с эндометриозом, у пациента, представляющего собой человека или млекопитающего животного. Кроме того? предлагается интервал эффективных доз NAC в лечении эндометриоза. В одном воплощении настоящего изобретения предписанный режим лечения можно использовать, например, для контроля частоты и интенсивности болевых симптомов (дисменорея, диспареуния и ациклическая хроническая тазовая боль), для снижения размера эндометриоидных поражений в конечном счете вплоть до их исчезновения, для снижения рецидивов после операции и/или для улучшения оплодотворения. Побочные эффекты данного лечения практически отсутствуют и, в частности, данное лечение не препятствует беременности.

В настоящем изобретении предлагается фармацевтическая композиция, содержащая N-ацетил-L-цистеин, для применения в лечении млекопитающего, включая человека с эндометриозом, где эта композиция предназначена для импульсного или прерывистого перорального введения, в течение периода времени два месяца или более, N-ацетил-L-цистеина в дозе, составляющей от 20 до 90 мг/кг/сутки в сутки, при введении.

В одном воплощении изобретения предлагается фармацевтическая композиция, содержащая N-ацетил-L-цистеин, для указанного выше применения, где композиция предназначена для введения в течение 3-5 последовательных суток с последующими 2-4 сутками перерыва. В еще одном воплощении фармацевтическая композиция, содержащая N-ацетил-L-цистеин, предназначена для введения в течение 1-3 последовательных суток с последующими 1-2 сутками перерыва.

В одном воплощении изобретения предлагается фармацевтическая композиция, содержащая N-ацетил-L-цистеин, для указанного выше применения, где композиция предназначена для введения N-ацетил-L-цистеина в дозе, составляющей от 30 до 60 мг/кг/сутки в сутки введения. В еще одном воплощении фармацевтическая композиция предназначена для введения N-ацетил-L-цистеина в дозе, составляющей от 30 до 45 мг/кг/сутки в сутки введения.

В одном воплощении изобретения предлагается фармацевтическая композиция, содержащая N-ацетил-L-цистеин, для применения, описанного выше, где фармацевтическая композиция защищена от света. В еще одном воплощении фармацевтическая композиция представляет собой водорастворимую таблетку. В еще одном воплощении фармацевтическая композиция содержит гидрокарбонат натрия. В одном воплощении фармацевтическая композиция представляет собой препарат с медленным высвобождением и/или препарат для защиты желудка.

В одном воплощении изобретения предлагается фармацевтическая композиция, содержащая N-ацетил-L-цистеин, для применения в лечении боли, вызванной эндометриозом. В еще одном воплощении фармацевтическая композиция предназначена для применения в лечении бесплодия, вызванного эндометриозом. В еще одном воплощении фармацевтическая композиция предназначена для применения в предварительном лечении млекопитающих с эндометриозом перед лапароскопией или операцией. В одном воплощении фармацевтическая композиция предназначена для применения в лечении млекопитающих с эндометриозом, после лапароскопии или операции, для предотвращения рецидивов.

В одном аспекте изобретения предлагается способ лечения млекопитающего с эндометриозом, включающий пероральное введение фармацевтической композиции, содержащей N-ацетил-L-цистеин, указанному млекопитающему в импульсной или прерывистой схеме приема в течение периода времени два месяца или более, N-ацетил-L-цистеина в дозе, которая составляет от 20 до 90 мг/кг/сутки в сутки при введении. В одном воплощении способа фармацевтическую композицию вводят в течение 3-5 последовательных суток с последующими 2-4 сутками перерыва. В еще одном воплощении фармацевтическую композицию вводят в течение 1-3 последовательных суток, с последующими 1-2 сутками перерыва.

В одном воплощении способа доза N-ацетил-L-цистеина составляет от 30 до 60 мг/кг/сутки в сутки введения. В еще одном воплощении способа доза N-ацетил-L-цистеина составляет от 30 до 45 мг/кг/сутки в сутки введения.

В одном воплощении способ предназначен для лечения боли, вызванной эндометриозом. В других воплощениях способ предназначен для лечения бесплодия, вызванного эндометриозом, для предварительного лечения млекопитающих с эндометриозом перед лапароскопией или операцией или для лечения после лапароскопии или операции, для предотвращения рецидивов эндометриоидных поражений.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Настоящее изобретение будет объяснено более подробно в следующем описании, со ссылкой на прилагаемые графические материалы, где:

на Фиг.1 показан ингибиторный эффект NAC на рост эндометриоидных поражений у мышей, как продемонстрировано в примере 1. Средняя общая масса контрольных (n=10) и NAC-обработанных (n=10) животных, через 21 сутки после имплантации, со стандартной ошибкой. Значимость p<0,05. Во вставках над гистограммами воспроизведены типичные картины эндометриом для контроля (А) и обработки NAC (В). Полоска: 1 см;

на Фиг.2А показаны типичные гели полуколичественной RT-PCR (полимеразная цепная реакция в реальном времени), как продемонстрировано в примере 1. На Фиг.2В показана пониженная экспрессия СОХ-2 и ММР-9 в кистах NAC-обработанных мышей, как продемонстрировано в примере 1. Значения полуколичественной RT-PCR, усредненные для 5 контрольных и 5 NAC-обработанных мышей со стандартной ошибкой;

на Фиг.3 показано перемещение Е-кадгерина в кистах NAC-обработанных мышей, как продемонстрировано в примере 1. Типичные изображения иммуноокрашивания Е-кадгерина в эндометриомах от контрольных (А и В) и NAC-обработанных мышей (С и D). В контрольных образцах можно наблюдать диффузное коричневатое окрашивание во всей цитоплазме эпителиальных клеток, в то время как в NAC-обработанных образцах это окрашивание четко ограничено на уровне контактов клетка-клетка. Увеличение оригинала 40х;

на Фиг.4 показано ослабленное окрашивание Сох-2 в кистах NAC-обработанных животных, как продемонстрировано в примере 1. Типичные изображения иммуногистохимического окрашивания кист контрольных мышей (А-С) и от NAC-обработанных мышей (D-F). В контрольных образцах обнаруживается заметное присутствие коричневатого окрашивания в нескольких областях, в то время как оно едва может быть обнаружено в NAC-обработанных образцах. Увеличение оригинала 40х;

на Фиг.5 показано ослабленное окрашивание Ki-67 в кистах NAC-обработанных животных, как продемонстрировано в примере 1. Типичные изображения иммуногистохимического окрашивания кист контрольных мышей (А-С) и NAC-обработанных мышей (D-F). Стрелки указывают на окрашенные, пролиферирующие клетки. Увеличение оригинала 40х;

на Фиг.6 показано схематическое представление уровня техники, демонстрирующее несколько механизмов, действующих, когда пролиферирующие клетки, которые показаны на примере раковых клеток, обрабатывают NAC. Эти механизмы сводятся к терминальной дифференциации клеток. Примеры настоящего описания также показывают, что по меньшей мере некоторые из этих эффектов также возникают, если NAC, согласно настоящему изобретению, применяют для лечения эндометриоза;

на Фиг.7 показаны результаты предварительного клинического исследования, выполненного суммарно на 64 женщинах, 33 пролеченных NAC и 31 непролеченном контроле. Изменение размера кист после трех месяцев лечения NAC измеряли при помощи ультразвука в виде максимального диаметра. На Фиг.7А показано изменение размера цист в абсолютных числах у пролеченных пациентов и контролей. На Фиг.7В показано то же самое сравнение в виде изменения в процентах.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

NAC в общем

N-ацетил-L-цистеин (NAC) представляет собой хорошо известное низкомолекулярное фармацевтическое лекарственное средство с химической формулой

Свойства NAC главным образом связаны с его тиоловой группой, которая делает его эффективным в большинстве биохимических путей, где задействован трипептидглутатион (GSH), присутствующий во всех тканях человека в относительно высоких концентрациях, даже выше 10 мМ. Цистеин действительно находится среди трех аминокислот, содержащих GSH, так что NAC считается предшественником GSH с его деацетилированным цистеином. NAC использовался и по-прежнему широко используется в качестве муколитического агента, когда способ действия в целом относится к окислительно-восстановительному разрушению чувствительных дисульфидных мостиков цистеина в белках слизи. Фактически NAC участвует в сложном окислительно-восстановительном цикле тиоловых групп, где действует несколько ферментов. Действительно, исключительной физиологической важностью обладает цикл образования и разрушения дисульфида, общий механизм, посредством которого регулируется активность белка и клеточная сигнализация. Ферменты, такие как протеинтирозинфосфатазы и тирозинкиназы, например, играют ключевые роли в контроле клеточного цикла, клеточной пролиферации и дифференциации, и многие из них регулируются окислительно-восстановительным состоянием их цистеинов.

В общем, хотя детальные механизмы действия не были окончательно выяснены, NAC, по-видимому, действует на все биохимические пути, где задействован GSH. Ферменты и белки, активность которых модулируется GSH, действуют в нескольких процессах, или непосредственно или посредством сети путей передачи сигналов. В этой ситуации, NAC может либо действовать аналогично GSH, либо может быть еще более эффективным, чем GSH.

GSH, например, обычно образует конъюгаты с реакционно-способными метаболитами, образованными парацетамолом и способствуют их детоксификации. Однако, когда принимают слишком большую дозу парацетамола, GSH истощается, и метаболиты парацетамола начинают взаимодействовать с клеточными белками, в конечном счете приводя к гибели клеток. В лечении скоротечной печеночной недостаточности после отравления парацетамолом NAC действует вместо GSH в детоксикации метаболитов парацетамола. Полагают, что у NAC фактически отсутствуют нежелательные побочные эффекты, на что также указывают высокие дозы NAC, которые используют в лечении отравления парацетамолом - предположительно примерно 40 г/сутки для пациента массой 70 кг.

В отличие от трипептида GSH, который может распадаться уже в желудке, простая молекула NAC свободно диффундирует почти во все ткани и клетки. Фармакокинетические исследования NAC определили пиковую концентрацию в плазме, достигаемую примерно за один час, с периодом полувыведения примерно три часа. Полный клиренс имеет место между шестью и двенадцатью часами.

NAC в качестве антипролиферативного, дифференцирующего агента

Недавно авторы изобретения обнаружили, что N-ацетил-L-цистеин (NAC) обладает заметным антипролиферативным воздействием на раковые клетки эпителиального происхождения - такого же происхождения, что и эндометриальные клетки (Cell Death and Differentiation 2005, 12(10): 1285-1296). Хотя рак и эндометриоз являются преимущественно неродственными заболеваниями, они имеют некоторые общие свойства, которые в конечном счете привели авторов изобретения к идее, что NAC может быть полезным также в лечении эндометриоза. В частности, эндометриоз, почти также как рак, представляет собой пролиферативное заболевание, хотя и с другим неизвестным лежащим в основе молекулярным механизмом и этиологией. Наблюдения, полученные для рака, будут представлены в данном описании изобретения в качестве предпосылки для эффектов NAC и в качестве вероятного способа действия также при эндометриозе.

NAC использовали для остановки пролиферации и индуцирования дифференциации в двух клеточных линиях аденокарциномы и в первичных нормальных клетках кератиноцитов, все клетки эпителиального происхождения. В этих системах дифференциацию характеризовали морфологически, биохимически и посредством анализа экспрессии гена (анализ экспрессии гена широко освещен в ВМС Cancer 2005, 5: 75).

В исследовании рака антипролиферативный эффект NAC не был связан с гибелью клеток или токсичностью, но, вместо этого, являлся следствием активации пути физиологической дифференциации, которую можно расценивать как нормализацию клеточных функций по отношению к ткани происхождения.

В дополнение к уменьшенной пролиферации также изменялась морфология NAC-обработанных раковых клеток. In vitro, эпителиальные клетки при активной пролиферации проявляют нерегулярную морфологию - мезенхимальную морфологию - и часто образуют несколько многоклеточных слоев. В отличие от этого, когда клетки претерпевают процесс дифференциации к структуре и функции их конечной целевой ткани, они останавливают пролиферацию, их морфология становится регулярной полигональной, каждая клетка иногда толще, и они образуют монослой смежных клеток. Этот процесс сопровождается возросшими соединениями клетка-клетка и клетка-субстрат, в соответствии со сдвигом от пролиферирующего мезенхимального к адгезивному, менее подвижному и дифференцированному фенотипу.

В целом, сложные серии метаболических изменений обнаруживались после добавления NAC к раковым клеткам, все из которых сводились к остановке неконтролируемой пролиферации и индуцированию их терминальной дифференциации, как изображено на схеме, показанной на Фиг.6.

Особенно лечение NAC индуцировало значительное увеличение адгезионных комплексов клетка-клетка и клетка-субстрат.Неконтролируемую пролиферацию можно отнести к состоянию, когда клетки потеряли контактное торможение и свою способность реагировать на сигналы дифференциации. Клетки, входящие на путь дифференциации, проявляют заметное увеличение комплексов соединения клетка-клетка, и этот процесс также, как правило, указывают как контактное торможение. Некоторые данные указывают на то, что сигналы клеткам для вхождения в конечную точку дифференциации порождают компоненты самих межклеточных комплексов. Эти соединения также являются путем распространения сигналов между клетками.

Мигрирующие клетки, такие как эндометриальные клетки при эндометриозе, должны в дополнение к пониженному количеству адгезионных комплексов, иметь и секретировать достаточное количество активных матриксных металлопротеиназ, ферментов, предназначенных для разрушения внеклеточного матрикса, для обеспечения возможности миграции через внеклеточный матрикс.Интересно, что в данной модели эпителиальных видов рака, NAC, как было обнаружено, подавляет этот фермент, позволяя предположить, что клеточная миграция была задержана. Также пример 1 данного описания действительно показывает, что NAC при использовании согласно настоящему изобретению для лечения эндометриоза подавляет экспрессию матриксной металлопротеиназы 9 (ММР-9). Это говорит о том, что NAC может препятствовать клеточной миграции как из эутопического эндометрия к новым имплантатам (предотвращение рецидивов), так и в эндометриоидной ткани (предотвращение дальнейших поражений).

Известный эффект NAC также имеет отношение к его противовоспалительному эффекту, причине его добавления в семейство нестероидных противовоспалительных лекарственных средств (NSAID). Профиль экспрессии гена NAC-обработанных клеток действительно показал подавление циклооксигеназы-2 (СОХ-2), индукция гена которой ассоциирована с воспалительными реакциями. Также этот эффект NAC был подтвержден в эндометриоидной ткани в примере 1 данного описания, свидетельствуя о том, что NAC также может ослаблять симптомы, связанные с воспалением при эндометриозе.

В качестве примера способности NAC модулировать сигнальную трансдукцию в клетках через окислительно-восстановительный статус чувствительных цистеинов, изучали фермент - нерецепторную тирозинкиназу с-Src в in vitro модели клеток карциномы толстой кишки (СаСо-2) и клеток карциномы яичников (OVCAR-3) (Free Radicals Biology and Medicine 2008, 45(11): 1566-72). c-Src вовлечена в переключение пролиферация/дифференциация и является активной в сборке/разборке связанных комплексов и цитоскелетной организации. Эта киназа активируется и сверхэкспрессируется в ряде раковых заболеваний человека, особенно в карциноме толстой кишки и яичников. Заметные международные усилия по разработке лекарственных средств действительно направляются на поиск специфических ингибиторов c-Src. Вместо этого было обнаружено, что посредством простого лечения клеток аденокарциномы с помощью NAC можно достичь цели - подавления c-Src с помощью механизма, относящегося к окислительно-восстановительным переходам в чувствительных цистеиновых остатках в c-Src, способного «выключать» данную киназу, доставлять ее в эндолизосомы, где она хранится или разрушается. Таким образом, NAC, индуцировавший терминальную дифференциацию в клетках аденокарциномы, был связан с подавлением c-Src. Стоит отметить, что активность этой киназы оказывается важной во время децидуальной фазы цикла эндометриальных клеток, таким образом позволяя предположить вовлечение ее дерегулирования при эндометриозе (Endocrine Journal, 2008, 55(5): 795-810).

NAC и эндометриоз

Как объясняется в предшествующем разделе, ранее предполагалось, что NAC можно было бы использовать в новых терапевтических стратегиях в отношении эндометриоза, на основании его применения в качестве антиоксиданта и акцептора ROS. В исследованиях эпителиального рака, описанных выше, авторы настоящего изобретения обнаружили, что NAC обладал некоторыми полезными воздействиями, отличными от таких как эффекты антиоксиданта и акцептора ROS, на клетки эпителиального рака, и что такие эффекты также могли бы быть полезными в лечении эндометриоидных клеток, в случае если эндометриоидные клетки отвечают подобным образом. В частности, ожидалось, что антипролиферативные и дифференцирующие эффекты NAC, обнаруженные при раке, также могут иметь место при использовании NAC в лечении эндометриоза.

Полагали, что если NAC обладает следующими молекулярными эффектами, наблюдавшимися при раковом заболевании, также на эндометриоидной ткани, он мог бы являться полезным для лечения эндометриоза;

1) увеличение соединений клетка-клетка и клетка-субстрат в соответствии со сдвигом от пролиферирующего к дифференцированному фенотипу;

2) уменьшение экспрессии матриксных металлопротеиназ, ассоциированных с уменьшением клеточной миграции;

3) уменьшение экспрессии циклооксигеназы-2 (СОХ-2), ассоциированной с уменьшенной воспалительной реакцией;

4) модулирование активности c-Src для регулирования эндометриального цикла пролиферации/децидуализации и для обеспечения возможной беременности.

Поэтому была выдвинута гипотеза, что NAC может оказывать следующие физиологические эффекты при эндометриозе:

1) уменьшение эндометриальной клеточной пролиферации;

2) уменьшение местного хронического воспаления, и таким образом облегчения связанной с ним боли;

3) нормализация ткани источника, эутопического эндометрия, посредством более регулярного цикла пролиферации-дифференциации;

4) уменьшенное количество эктопических эндометриальных клеток, связанное с уменьшенной клеточной подвижностью вследствие как снижения тканевых металлопротеиназ, так и уменьшенных соединений клетка-клетка и клетка-субстрат;

5) реорганизация конформации эстрогеновых рецепторов посредством повторной сборки дисульфидных мостиков в релевантных цистеиновых остатках.

В целом, все предполагаемые результаты подтверждали или непосредственно или косвенно через ответ пациентов в клиническом исследовании и посредством гистологического анализа их биопсий или, в животной модели, на уровне морфологии, гистологии, биохимии и молекулярной биологии.

В частности, авторы изобретения обнаружили, что NAC действительно снижает экспрессию циклооксигеназы-2 (СОХ-2) и матриксной металлопротеиназы 9 (ММР-9) в эндометриоидной ткани. Они также демонстрируют, что NAC индуцирует релокализацию Е-кадгерина из цитоплазмы в эндометриоидной ткани в межклеточных соединениях в ткани, обработанной NAC. Это указывает на увеличение межклеточных соединений, которое согласуется с уменьшением клеточной пролиферации. Действительно, другие эффекты, такие как возросшая экспрессия р21 и уменьшенная экспрессия Ki-67, также указывают на то, что лечение NAC при эндометриозе приводит к уменьшенной клеточной пролиферации. Авторы изобретения также демонстрируют, что эти молекулярные эффекты NAC-лечения эндометриоза приводят к уменьшению размера эндометриоидных поражений, облегчению боли и к желаемой беременности. Преимущество при использовании NAC для лечения эндометриоза или показаний, связанных с эндометриозом, заключается в том, что не требуется использовать обычно применяемые гормональные лечения для эндометриоза, которые подавляют функции яичников. Применение NAC, таким образом, сравнительно увеличивает вероятность этих пациентов забеременеть. Лечение NAC перед операцией также приводило к более правильным и компактным эндометриомам, которые легче удалялись, и вызывало крайне малое кровотечение во время лапароскопии.

Схема приема

Из исследования лечения NAC на клеточных линиях аденокарциномы и первичных нормальных клетках кератиноцитов (Cell Death and Differentiation 2005, 12(10): 1285-1296) был сделан вывод, что эффективная доза NAC для индукции антипролиферативного-дифференцирующего эффекта варьировалась и зависела от типа клеток. Таким образом, происхождение ткани диктует эффективную концентрацию NAC, которая требуется, чтобы наблюдалось полное блокирование пролиферации, должна быть определена для каждой ткани. Кроме того, дозу NAC также соотносили со злокачественностью клеток. Более подробно, в то время как нормальным клеткам требовалась низкая доза для остановки пролиферации и начала дифференциации, клеткам карциномы с характерным неблагоприятным прогнозом требовалась более высокая концентрация NAC.

Для цели настоящего изобретения схему приема NAC для лечения эндометриоза у млекопитающего, включая человека, разрабатывали на основании следующих критериев:

1) дозировка NAC в сутки, которая согласуется с другими современными клиническими лечениями и считается не имеющей нежелательных побочных эффектов;

2) доза, которая считается достаточно высокой для удовлетворения требованию аномально пролиферирующих клеток, чтобы перевести их на путь дифференциации;

3) учитывая описанное уменьшение уровня NAC в плазме после продолжительных лечений (Pendyala L, Creaven PJ. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 1995; 4:245-51), перерыв в лечении в течение примерно половины каждой недели считали оптимальным биологическим ответом в лечении в течение двух месяцев или дольше.

Композиция по настоящему изобретению, содержащая NAC, для лечения эндометриоза или показаний, ассоциированных с эндометриозом, согласно одному воплощению подлежит введению в дозе от приблизительно 20 до 90 мг/кг/сутки. Нижний предел основан на удвоенной дозе, применяемой для муколитического действия, то есть известно, что она сама по себе обладает физиологическим эффектом. Верхний предел основан на соображении, что более высокие дозы, как обнаружено, вызывают проблемы с желудком у многих пациентов. В еще одном воплощении настоящего изобретения композиция содержит NAC для введения в дозе приблизительно 30-60 мг/кг/сутки. Показано, что нижний предел эффективен при эндометриозе, и известно, что верхний предел фактически не имеет побочных эффектов. В еще одном воплощении настоящего изобретения композиция содержит NAC для введения в дозе приблизительно 30-45 мг/кг/сутки. Неожиданно было показано, что эта низкая дозировка является эффективной при эндометриозе.

В одном воплощении композиция подлежит введению в течение периода времени, который составляет два месяца или более, или предпочтительно три месяца или более. Чтобы воспрепятствовать уменьшению уровня NAC в плазме после продолжительного лечения, можно вводить NAC в предписанной дозировке прерывистым образом, то есть согласно прерывистой схеме приема/лечения. Прерывистое введение или лечение означает, что лечение прерывают на периоды, то есть, что фармацевтическую композицию вводят в течение некоторого периода времени, например нескольких суток, с последующим перерывом во введении, когда фармацевтическую композицию не вводят в течение некоторого периода времени, например в течение нескольких суток. Прерывистое лечение может быть регулярным, например лечение в течение фиксированного количества суток или недель с последующим перерывом в течение фиксированного количества суток или недель. Примеры включают повторяющиеся схемы с лечением в течение 4 суток с последующим перерывом в течение 3 суток каждую неделю, или лечение в течение 2 недель с последующим перерывом 1 неделю. Особый случай регулярного прерывистого лечения представляет собой импульсное лечение, то есть регулярное лечение и длительность перерыва, например введение каждые вторые сутки или введение в течение двух суток с последующими двумя сутками перерыва и так далее. Также являются возможными схемы нерегулярного прерывистого лечения, которые повторяют нерегулярно или имеют более сложную схему, которую повторяют, например в зависимости от ответа на лечение. В разных иллюстративных воплощениях настоящего изобретения предписанную дозу NAC вводят в течение 3-5 последовательных суток с последующими 2-4 сутками перерыва, или вводят в течение 1-3 последовательных суток с последующими 1-2 сутками перерыва.

В одном воплощении, со ссылкой на массу тела приблизительно 60 кг, доза NAC находится в интервале от 1,2 до 5,4 г/сутки, предпочтительно от 1,8 до 3,6 г/сутки. Эту дозу можно разделять на два или более, предпочтительно три или четыре, суточных введения либо из одной, либо двух доз (например, пилюль) каждое, где каждая доза может содержать, например, 0,15-2,7 г NAC или предпочтительно 0,6-1,2 г NAC. Лечение включает введение вышеупомянутых доз импульсно или прерывисто, например каждые вторые сутки или в течение трех-четырех последовательных суток каждую неделю, с перерывом от четырех до трех суток соответственно. Минимальная общая длительность лечения оставляет от двух месяцев, при отсутствии максимальной длительности. Для пациентов с другими массами, например субъектов с массой выше или ниже указанной, суточную дозу следует соответственно скорректировать.

В одном воплощении настоящего изобретения фармацевтическая композиция для лечения эндометриоза или родственных эндометриозу симптомов, содержит NAC в дозе 150-5400 мг для введения двумя или более введениями в сутки в течение периода по меньшей мере 2 месяца, такого как по меньшей мере 3 месяца. В предпочтительном воплощении настоящего изобретения фармацевтическая композиция содержит NAC в дозе 230-3600 мг для введения двумя или более введениями в сутки в течение периода по меньшей мере 2 месяца, такого как по меньшей мере 3 месяца. Лечение включает введение вышеуказанных доз импульсно или прерывисто, например каждые вторые сутки или в течение трех-четырех последовательных суток каждую неделю с перерывом от четырех до трех суток соответственно.

Фармацевтические композиции

Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению может быть приготовлена способом, который сам по себе известен специалисту в фармацевтической области. Композиция может содержать эффективное количество NAC в соответствии с изобретением, а также подходящий носитель или эксципиент, который служит средством доставки или средой для активного ингредиента. Такие носители или эксципиенты известны в данной области техники и включают твердые вещества, такие как лимонная кислота, цитрат натрия, карбонат натрия (кислота) плюс ароматизатор. Фармацевтическая композиция предпочтительно адаптирована для перорального введения. Такие композиции могут быть введены в разных формах, в настоящее время предпочтительно в виде таблеток. Также возможны другие формы, такие как капсулы, суппозитории, растворы, суспензии, сиропы или тому подобное.

Изобретение требует строгой оценки фармацевтического качества препарата NAC для получения эффективной дозы. Поэтому следует применять бренды или сертифицированные непатентованные препараты. NAC не является стабильной молекулой, его активный тиоловый остаток может быть легко окислен кислородом, светом и другими излучениями, так что эффективная доза может быть не достигнута. Препарат, таким образом, предпочтительно защищен от света, в растворимых таблетках, с гидрокарбонатом натрия, который содействует частичному удалению кислорода из воды во время растворения.

Наблюдалось, что высокие дозы NAC могут вызывать абдоминальную боль. Для преодоления этого возможно предложение NAC в композиции с защитой желудка, подходящей для предотвращения высвобождения/растворимости NAC в желудке. Такие композиции хорошо известны в данной области техники и могут быть использованы в настоящем изобретении. Например, можно использовать таблеточные покрытия, которые устойчивы к жидкостям желудка и делают возможным высвобождение лекарственного средства только в кишечнике после его прохождения через желудок. Обычно используемые композиции включают полимеры, такие как производные целлюлозы, сополимеры сложных аминоэфиров метакрилата. Покрытие защищает ядро таблетки от разрушения в кислой среде желудка посредством применения чувствительного к pH полимера, который набухает или солюбилизируется после прохождения через желудок в ответ на увеличение pH, с высвобождением лекарственного средства.

Другим вариантом является снижение дозы NAC, поступающей в ток крови одновременно. Введение NAC три или более раз в сутки может быть трудновыполнимым для пациента. Несмотря на это, повторяющееся введение может быть желательным для достижения почти постоянной концентрации NAC в сыворотке. Для преодоления этих проблем введение один или два раза в сутки, например утром и ночью, может быть более легким для выполнения пациентом. Одним вариантом является предложение NAC в композиции с медленным высвобождением (также называемым замедленным высвобождением или регулируемым высвобождением). Такая композиция делает возможным введение большей дозы с более длинными интервалами, так как способна снижать скорость диффузии и захват NAC в кровоток. Затем доза распределяется в крови в течение продолжительного времени в небольших количествах, например в течение 12+12 часов в случае схемы приема два раза в сутки. Множество разных технологий и композиций для замедленного высвобождения давно известны в данной области техники и могут использоваться в настоящем изобретении. В таких технологиях активное вещество, например, инкапсулируют в оболочку или матрицу, которая является нерастворимой или менее растворимой в жидкой среде организма, куда ее вводят. Композиции, обладающие комбинированным эффектом медленного высвобождения и защиты желудка, также являются возможными и могут использоваться в настоящем изобретении.

Применение/медицинские показания настоящего изобретения

Показано, что настоящее изобретение обладает полезными свойствами во многих аспектах, связанных с эндометриозом, и может применяться как для лечения эндометриоза, так и для лечения различных показаний, ассоциированных с эндометриозом. Под лечением различных показаний, ассоциированных с эндометриозом, понимают, например, лечение для облегчения симптомов заболевания, таких как боль и воспаление; лечение для увеличения вероятности наступления беременности; предварительное лечение перед операцией для облегчения удаления эндометриоидных поражений и для улучшения результата операции; лечение после операции для предотвращения рецидива поражений; и профилактическое лечение в случае подтвержденных, оцененных факторов риска или наличия наследственного эндометриоза.

Было показано, что NAC, согласно настоящему изобретению, уменьшает размер поражения и возвращает пролиферативную ткань к более дифференцируемой, нормальной ткани. Таким образом, в одном воплощении настоящего изобретения фармацевтическая композиция содержит NAC для лечения эндометриоза с целью снижения - в конечном счете вплоть до их исчезновения - эндометриом, спаек, перитональных имплантатов и глубоких поражений, локализованных в ректовагинальной перегородке или в других местах.

Также было показано, что NAC, согласно настоящему изобретению, ослабляет симптомы боли, вызванной эндометриозом. Таким образом, в еще одном воплощении настоящего изобретения фармацевтическая композиция содержит NAC для ослабления боли, ассоциированной с эндометриозом.

В еще одном воплощении настоящего изобретения фармацевтическая композиция содержит NAC для стимулирования желаемой беременности у пациента с эндометриозом.

В еще одном воплощении настоящего изобретения фармацевтическая композиция содержит NAC для предварительного лечения перед лапароскопией или операцией в случаях эндометриоза, для облегчения удаления массы, уменьшения кровотечения, чтобы сделать ткани стать более компактными/менее хрупкими.

В еще одном воплощении настоящего изобретения фармацевтическая композиция содержит NAC для предотвращения рецидивов после лапароскопии или операции.

В еще одном воплощении настоящего изобретения фармацевтическая композиция содержит NAC для применения в случае подтвержденных, оцененных факторов риска, для предотвращения эндометриоза вследствие наследственного заболевания.

Далее изобретение будет дополнительно описано и проиллюстрировано посредством следующих примеров. Следует отметить, однако, что эти примеры не следует рассматривать как ограничивающие изобретения каким-либо образом.

Пример 1. Эффект NAC в мышиной модели эндометриоза

Материалы и методы

Вещества. Если не указано, все химикаты были от Sigma-Aldrich, Milan, Италия.

Животные. 36 самок BALB/C мышей в возрасте 6-8 недель приобретали у Charles River Italia (Calco, Италия). Корма в виде гранул (обогащенная стандартная диета; Mucedola, Milan, Италия) и воды предоставляли, сколько угодно. Животных содержали в цикле свет/темнота 16/8 часов в контролируемых условиях. Перед любой инвазивной процедурой мышей анестезировали посредством внутрибрюшинной инъекции 0,4 мл физиологического раствора, содержащего 2,5% авертина.

Индукция эндометриоза. Индукцию эндометриоза выполняли, следуя способу, описанному в Somigliana et al, Hum Reprod 1999 Dec;14(12):2944-50. Хирургические вмешательства выполняли в чистых условиях. Кратко, рога матки сингенных мышей удаляли через небольшой срединный разрез в брюшной полости чуть ниже пупка и помещали в чашку Петри, содержащую фосфатно-солевой буферный раствор (PBS). Фрагменты эндометрия получали мелким дроблением рогов матки, используя лезвие бритвы. Фрагменты суспендировали в 0,6 мл PBS и быстро инокулировали в брюшную полость мышей-реципиентов в соотношении один донор на два реципиента. Мышей с индуцированным эндометриозом случайным образом разделяли на две группы по 12 мышей каждая: контроль и обработка NAC.

Обработка NAC. Через сутки после имплантации эндометрия мышей из группы лечения подвергали зондовому питанию с помощью 100 мкл 10 мг/мл основного раствора NAC в воде. Контрольная группа получала только воду. Введение NAC продолжали ежедневно в течение 21 суток. Учитывая среднюю массу тела мыши 22,5±0,7, доза NAC 1 мг/мышь соответствует 44 мг/кг/сутки. Не было отмечено никаких признаков токсичности при введении дозы на основании массы тела - неизмененной в конце лечения - в отношении потребления пищи, груминга или уровни активности по сравнению с контролями. В конце лечения мышей убивали посредством смещения шейных позвонков.

Сбор эндометриом. В конце лечения животных умерщвляли и эндометриоидные поражения осторожно вырезали из окружающей ткани, оценивали их общую массу и количество. Кисты либо сразу же фиксировали в 10% формалине, либо замораживали в жидком азоте и хранили при -80°C.

Гистология и иммуногистохимия. Фиксированные в формалине образцы заливали парафином и тканевые срезы (толщиной 5 мкм) окрашивали, используя гематоксилин-эозин. Все микроскопические препараты оценивал опытный патологоанатом, который действовал вслепую в отношении исследования, и гистологический диагноз эндометриоза был основан на морфологической идентификации эндометриальной гландулярной ткани и стромы.

Для иммуногистохимии срезы депарафинизировали и регидратировали в марочном этаноле. Для извлечения антигена срезы обрабатывали микроволнами в течение 6 мин в 0,1 М цитратном буфере (pH 6,0) и активность эндогенной пероксидазы блокировали посредством инкубирования в течение 20 мин в 3% смеси Н 2 О 2 /метанол. Срезы промывали в смеси PBS/ТритонХ-100, погружали на 15 мин в 1% смесь PBS-бычий сывороточный альбумин (BSA), чтобы блокировать участки неспецифического связывания, и затем инкубировали с выбранным первичным антителом, разбавленным в 1% PBS-BSA. Для иммунологического анализа циклооксигеназы (СОХ)-2 (кролика к мыши поликлональные, Cayman Chemical, Milan, Италия), Ki-67 (кролика к человеку поликлональные, Monosan Xtra, DBA Italia, Segrate, Италия) и E-кадгерина (BD Biosciences, Milan, Италия) инкубацию выполняли в течение ночи при 4°C и разведения представляли собой 1:100, 1:600, 1:200 соответственно. Иммуногистохимическое окрашивание продолжали, используя DAKO Cytomation LSAB2 System-HRP (Dako Italia, Milan, Италия), и участки связывания антител визуализировали при помощи раствора strept кролика против человека поликлональных антител авидин-биотин пероксидазного комплекса, используя диаминобензидин в качестве хромогена. Срезы контрастно окрашивали гематоксилином, обезвоживали, помещали в канадский бальзам и затем рассматривали с помощью микроскопа Leica. Количественное определение экспрессии Ki-67 выполняли слепым способом с помощью двух независимых наблюдателей; каждый наблюдатель подсчитывал по меньшей мере 200 клеток в более чем 10 случайным образом выбранных полях для каждого образца и индекс мечения Ki-67 выражали в процентах.

Экстракция РНК, полуколичественная RT-PCR (полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией) и qRT-PCR (количественная RT-PCR). Общую РНК выделяли посредством лизиса замороженных эндометриальных кист с TissueLyser (QIAGEN, Milan, Италия), используя реагент Тризол (Invitrogen, Milan, Италия) в соответствии с инструкциями изготовителя. Один микрограмм общей РНК из каждого образца обрабатывали 1 Ед ДНКазы I (Invitrogen) и обратно транскрибировали 200 Ед обратной транскриптазы Superscript III (Invitrogen), используя 250 нг выбранных случайно праймеров в 20 мкл конечного объема. Такой же продукт кДНК, полученный от каждого образца, использовали для последующей ПЦР амплификации с наборами праймеров, полученных для целевых генов. Конститутивный ген 18S РНК использовали в качестве внутреннего контроля. Образцы отрицательного контроля состояли из реакционной смеси и праймеров без кДНК-матрицы. Последовательности праймеров (Таблица 1) создавали, используя программное обеспечение Primer-BLAST, доступное онлайн на: http://www.ncdi.nlm.nih.gov/

Сначала вычисляли соотношение между образцом и конститутивным геном посредством синхронной амплификации ген-специфической мРНК и 18S РНК в одной реакционной пробирке. Так как эта процедура не была успешной для всех образцов - возможно из-за относительно небольшого количества специфических транскриптов и, таким образом, предпочтительной амплификации мРНК 18S - для предотвращения количественных неточностей, происходящих от конкурентых эффектов, целевые гены и кДНК 18S, созданные в одной и той же реакции RT, амплифицировали в отдельных пробирках. Чтобы документировать амплификацию в экспоненциальном интервале, создавали график амплификации для РНК 18S и выбирали соответствующее количество циклов. Полуколичественную ПЦР выполняли в реакционном объеме 25 мкл с 1 мкл кДНК, 2 мМ MgCl 2 , 0,2 мМ dNTP, 0,5 мкМ каждого праймера и 1,25 Ед полимеразы Hotstart Taq (QIAGEN). ПЦР амплификацию выполняли с помощью iCycler (Bio-Rad, Milan, Италия). Затем продукты ПЦР электрофоретически разделяли на 1,5% агарозном геле и окрашивали бромидом этидия. Уровни целевой мРНК оценивали посредством денситометрического сканирования и нормализовали против 18S загруженных контролей. Денситометрические анализы продуктов ПЦР выполняли, используя программное обеспечение для обработки изображений Quantity One (VersaDOC, Bio-Rad).

Таблица 1
Последовательность праймеров, использования для полуколичественного qRT-PCR
Целевая мРНК	Праймеры	Последовательность	Отжиг (на 30 секунд)	Число циклов	Продукт ПЦР (пар оснований)
18S РНК NR_003278.1	прямая обратная	CGCGGTTCTATTTTGTTGGT	60°C	18-24	219
AGTCGGCATCGTTTATGGTC
СОХ-2 NM_011198.3	прямая обратная	CCCCCACAGTCAAAGACACT	60°C	35	196
AGTTGCTCATCACCCCACTC
ММР-9 NM_013599.2	прямая обратная	TGAATCAGCTGGCTTTTGTG	60°C	35	242
GTGGATAGCTCGGTGGTGTT
Р21 (cdknla) NM_007669.4	прямая обратная	TCCACAGCGATATCCAGACA	60°C	35	196
ACGAAGTCAAAGTTCCACCG

Результаты

Влияние обработки NAC на рост эндометриоидных поражений. Через двадцать одни сутки после индукции эндометриоза всех экспериментальных мышей умерщвляли и их эндометриомы удаляли и собирали. Из 12 контрольных мышей одна умерла и у одной не развились эндометриомы. Из 12 мышей, обработанных NAC, у двух не развились эндометриомы. Морфологически эктопические поражения были крупными, кистозными и васкуляризированными: они состояли из заполненных жидкостью кист, которые были либо белыми, красными, либо изредка коричневыми по цвету, и предпочтительно локализовались на брюшине абдоминально-тазовой полости. Во вставках Фиг.1.1 авторы изобретения представляют типичные изображения кист от контрольных (А) и NAC-обработанных (В) животных. В среднем, значительное уменьшение массы наблюдалось в группе лечения (n=10) по сравнении с контролями (n=10) (Фиг.1).

NAC снижает экспрессию СОХ-2 и ММР-9 и выключает пролиферацию. Анализ RT-PCR показал, что, относительно кист от контрольных мышей (п=5), обработка NAC (n=5) индуцировала значительное уменьшение уровней СОХ-2 (-32%) и ММР-9 (-34%) мРНК, со значимостью p<0,01, которые нормализовали к экспрессии 18S (Фиг.2А и В). Ген Р21, обычно экспрессирующийся только, когда цикл пролиферации блокирован, ни разу не экспрессировался в 5 контролях, хотя он экспрессировался в 3 из 5 изучаемых NAC-обработанных образцах (типичный пример на Фиг.2А).

NAC запускает в действие релокализацию Е-кадгерина. Иммуногистохимическое обнаружение Е-кадгерина было положительным в 100% изучаемых случаев. Мечение было ограничено гландулярными эпителиальными клетками, в то время как ни один образец не представлял стромальное окрашивание. На клеточном уровне в кистах контрольных мышей авторы изобретения обнаружили, что окрашивание Е-кадгерина было рассеянным по всей клеточной цитоплазме, в то время как в кистах NAC-обработанных мышей Е-кадгерин главным образом обнаруживали вдоль межклеточных соединений (Фиг.3). Е-кадгерин является частью многобелкового адгезионного комплекса, поэтому его возросшее присутствие на границах клеток указывает на увеличение межклеточных сцеплений. Кроме того и в соответствии с экспрессией Р21, описанной выше, это перемещение согласуется с потерей пролиферирующего поведения у клеток, переключенных на терминальную дифференцировку (Conacci-Sorrell et al, J. Clin. Invest. 2002, 109: 987-991; Parasassi et al, Cell Death Differ. 2005, 12: 1285-1296).

Обработка NAC уменьшает количество Cox-2 в эндометриомах. Иммуногистохимическое обнаружение связанного с воспалением белка Сох-2 показало, что по отношению к кистам от контрольных мышей, образцы, собранные от NAC-обработанных мышей, показали довольно ослабленное окрашивание, которое в некоторых случаях полностью отсутствовало (Фиг.4).

NAC уменьшает количество пролиферирующих клеток. Антиген Ki-67 (Ki-67) является классическим маркером клеточной пролиферации, у покоящихся, находящихся в фазе покоя клеток, у которых полностью отсутствует экспрессия Ki-67. При использовании для окрашивания кист контрольных мышей можно было обнаружить несколько меченых клеток (стрелки в панелях А-С на Фиг.5). Вместо этого очень мало меченых клеток было обнаружено в кистах NAC-обработанных мышей (стрелки в панелях D-F на Фиг.5). Статистическая оценка, выполненная на 8 животных в каждой группе (10 изображений/200 мышиных клеток), обеспечивала 54%-ное уменьшение пролиферирующих клеток (Таблица II).

Обсуждение

Животная модель эндометриоза была эффективной в индуцировании эктопических эндометриальных имплантатов. Только у одного животного в контроле и двух в NAC-обработанной группе не оказалось эндометриом.

В соответствии с ожиданиями, масса - пропорционально размеру - кист была ниже у NAC-обработанных мышей. Это можно объяснить антипролиферативным эффектом NAC (Parasassi et al, Cell Death Differ. 2005, 12: 1285-1296), который широко проиллюстрирован в данном описании анализом экспрессии гена и иммуногистохимией. Действительно Р21, ген, экспрессирующийся только в дифференцирующихся, непролиферирующих клетках, наблюдался у 60% NAC-обработанных животных, в то время как он не экспрессировался в контролях. Напротив, белок Ki-67, который экспрессируется только в пролиферирующих клетках, показал 54% уменьшение у NAC-обработанных относительно контрольных мышей.

Релевантные белки при эндометриозе, такие как ММР-9 (Collette et al., Hum Reprod 2006; 21:3059-3067) и Cox-2 (Carli et al, Endocrinology 2009; 150: 3128-3137), показали уменьшение после обработки NAC. ММР-9 считается основным для клеточного движения и инвазивного поведения, в то время как Сох-2 является хрестоматийным ферментом, ассоциированным с воспалением. Оба родственных гена показали уменьшение примерно 30% после обработки NAC. Кроме того, количество Сох-2 также изучали при помощи гистохимического окрашивания в кистах, и результаты продемонстрировали релевантное ослабление при окрашивании.

На основе широко признанного представления, рассматривающего цитоплазматический Е-кадгерин в качестве маркера пролиферативного поведения клеток, в то время как его нахождение в межклеточном адгезионном комплексе, напротив, рассматривается и как маркер, и как индуктор дифференцировки, авторы изобретения также изучали локализацию Е-кадгерина в кистах контрольных и NAC-обработанных мышей. Результаты находятся в идеальном согласии с предшествующими данными, полученными авторами изобретения на клетках аденокарциномы (Parasassi et al., Cell Death Differ. 2005,12: 1285-1296), свидетельствуя о перемещении Е-кадгерина из клеточной цитоплазмы к границам клетки после обработки NAC. Такая ассоциация Е-кадгерина с адгезионным комплексом также находится в согласии с менее подвижным, менее инвазивным поведением клеток.

В заключение, во всех рассмотренных отношениях NAC может представлять собой оптимальное лечение эндометриоза. При переносе на лечение женщин, это лекарственное средство имеет значимое преимущество, фактически не имея побочных эффектов по сравнению с величиной нежелательных эффектов при гормональном лечении. Поэтому NAC можно использовать для уменьшения величины кист, для уменьшения местного воспаления и ассоциированной хронической боли и для уменьшения рецидива после операции. Этот последний пункт обусловлен уменьшенной пролиферацией и сниженной клеточной подвижностью.

Пример 2. Предварительное клиническое исследование действия NAC в лечении эндометриоза.

Цель исследования. Данное пилотное клиническое исследование было разработано для лечения женщин с эндометриозом посредством применения NAC вместо других видов лечения. Единственным возможным дополнительным лечением были анальгетики для облегчения боли, когда это было необходимо.

Критерии включения пациентов. Женщины с начальным диагнозом эндометриоз, основанным на боли и подтверждении заболевания при помощи УЗИ яичников, и пациенты с рецидивом боли и/или эндометриомы яичников после лапароскопического лечения были включены в данное исследование.

Перед лечением измеряли интенсивность болевых симптомов с помощью 10-балльной визуальной аналоговой шкалы (VAS) и характеристики эндометриом яичников посредством чрезвлагалищного УЗИ. Во время лечения NAC другие виды лечения были исключены, за исключением анальгетика для лечения боли, когда это было необходимо.

Пациенты. С февраля 2008 года до июля 2010 года 64 женщины со средним возрастом 35±7 лет (±SD) с диагностированным эндометриозом яичников были включены в исследование, 33 из них было назначено лечение NAC (средний возраст: 37±6 лет), в то время как 31 не следовали NAC- или какому-либо другому лечению и рассматривали в качестве контрольных случаев (средний возраст: 33±8 лет). У всех из них присутствовала одна или более кист в одном или обоих яичниках.

Лечение. Предписанная доза NAC была близкой к используемой в исследовании животных, 30 мг/кг/сутки. На практике, для средней массы тела 60 кг, для всех зарегистрированных пациентов были предписаны три пероральные дозы по 600 мг NAC три раза в сутки в течение трех последовательных суток каждую неделю с четырьмя сутками перерыва. Результатом были 1,8 г NAC в сутки, 5,4 г в неделю, 21,6 г в месяц. Эти точные способы лечения были основаны на следующих соображениях: 1) доза 1,8 г NAC в сутки находится в согласии с другими современными клиническими видами лечения и считается не имеющей нежелательных побочных эффектов; 2) установленные фармакокинетические показатели NAC, три суточные дозы по 0,6 мг приближаются к почти постоянному уровню в плазме без дискомфорта для пациентов во время комплексного лечения; 3) установленное зарегистрированное уменьшение уровня NAC в плазме после продолжительных лечений (Pendyala L, Creaven PJ. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 1995; 4:245-51), остановка лечения в течение примерно половины каждой недели обеспечивает оптимальный биологический ответ при длительном лечении, например от двух до шести месяцев или дольше.

Контроль. Интенсивность болевых симптомов (шкала боли VAS) и размер эндометриом яичника (клиническое и US обследование) оценивали после первых трех месяцев лечения. При необходимости через 3 месяца осуществляли лапароскопическое лечение.

Результаты

Данные после первого трехмесячного контрольного периода описаны ниже.

Изменение размера кист (неизмененные, увеличенные или уменьшенные) после трех месяцев лечения NAC, который измеряли при помощи ультразвука как максимальный диаметр, показано на Фиг.7А (абсолютное количество кист) и Фиг.7В (процент кист). На фигурах показано сравнение кист у пациентов, пролеченных NAC, и киста у нелеченных контролей. В процентах (Фиг.7В) уменьшение размера кист наблюдалось в 38% случаев, в то время как у контролей только менее 10% случаев показали самопроизвольное уменьшение. Учитывая уменьшение размера эндометриом, несколько (21 из 33) пациентов решили отменить или отложить запланированную лапароскопию.

Болевые ощущения после лечения NAC также изменялись. Боль оценивали до и после трехмесячного лечения, по 10-балльной визуальной аналоговой шкале (VAS), где ноль представлял собой отсутствие боли, а 10 баллов представляли самую сильную мыслимую боль. Интенсивность симптомов классифицировали как отсутствие (0), слабая (1-4), умеренная (5-7) или тяжелая (8-10). Пролеченные NAC пациенты сообщали об уменьшении боли в среднем от 7,6±0,3 до 5,1±0,8 (р<0,01) после трех месяцев лечения.

Не сообщалось ни о каких вредных побочных эффектах.

Хотя авторы изобретения не оценивали, желали ли пациенты беременность, и поэтому не могут охарактеризовать статистическую значимость полученных данных, авторы изобретения также сообщают о трех случаях беременности, очевидно невозможных с используемыми в настоящее время терапиями эндометриоза, нацеленными на подавление функции яичников.

Примечательным являлось наблюдение, описанное опытным хирургом, что при лапароскопии после лечения NAC эндометриома была более регулярной и компактной и более легко удаляемой, поэтому связанной со значительным уменьшением кровотечения во время лапароскопии.

В еще одном случае узелок на ректовагинальной перегородке исчез, что свидетельствует об эффективности NAC за пределами эндометриом яичников.

Пример 3. Воздействие импульсного, прерывистого и ежесуточного лечения NAC на экспериментально индуцированный эндометриоз: вагинальная гиперчувствительность у крыс, как сигнал боли - пилотное исследование

Материалы и методы

Животные. Использовали 16 взрослых неоплодотворенных самок крыс Sprague-Dawley. Они весили 200-230 г в начале исследования и содержались по отдельности в комнате с контролируемой температурой в пластиковых клетках, застеленных подстилкой. Крысы имели свободный доступ к воде и крысиному корму и содержались в 12-часовом цикле свет/темнота с включением освещения в 07:00. Репродуктивный статус (предтечка, течка, послетечка и диэструс) определяли путем ежесуточного осуществления промывания влагалища.

Экспериментальная модель и предхирургическая тренировка. Перед индукцией эндометриоза крыс тренировали на выполнение реакции избегания для прекращения расширения влагалища, производимого надувным латексным баллоном. Небольшой ненадутый латексный баллон соединяли с тонким катетером, смазанным перед введением в середину вагинального канала. Надувание баллона разными объемами воздуха растягивало вагинальный канал. Давление, производимое каждым растягиваемым объемом, измеряли для контроля посредством датчика давления малого объема. Аппаратура для тестирования представляла собой небольшую цилиндрическую камеру из органического стекла, созданную для содержания крысы так, чтобы помешать ей поворачиваться. Открывание задней части камеры позволяло соединить катетер, присоединенный к вагинальному стимулятору, со стимулирующим аппаратом. Фоточувствительный элемент определял положение крысы в камере. Если крыса растягивалась, как части реакции избегания, то световой луч прерывался и воздействие прекращали. Крысам давали освоиться в камере тестирования путем помещения их в камеру на 15 мин ежедневно в течение 5 суток. Затем крыс, во время сеансов тренировки, приучали к механической реакции избегания для уменьшения растяжения влагалища, которая включала вытягивание крысой головы для прерывания светового луча. Все крысы обучались реакции избегания за 4 сеанса. После обучения начинали сеанса тестирования.

Сеансы тестирования выполняли 3 раза/неделю в не следующие подряд сутки. Каждый сеанс тестирования включал ряд испытаний контролируемого избегания. Каждое испытание состояло из быстрого надувания баллона (1 мл/с) до фиксированного объема, который сохранялся либо до осуществления крысой реакции избегания или протяжении 15 секунд, и баллон быстро сдували. Разные объемы расширения, включая контрольный объем (0,01 мл), нагнетали каждый три раза в случайном порядке. Максимальный период ожидания 15 секунд считался отсутствием ответа.

Время до ответа и реакции избегания измеряли как функцию объема расширения для каждого сеанса, как описано в Cason AM et al (Horm Behav. (2003), Vol.44, pages 123-31). Чем короче было время до ответа и меньше объем, дающий ответ, тем сильнее была реакция избегания у крысы. Для каждой крысы реакции избегания и давление/объемы для всех сеансов у данной крысы (по меньшей мере 12 сеансов) объединяли и вычисляли средние значения величин. Во всех четырех экспериментальных группах (см. ниже) обнаружили, что исходные реакции избегания на растяжение влагалища до хирургической операции по поводу эндометриоза были очень похожи.

Индуцирование эндометриоза. Эндометриоз у крыс можно экспериментально индуцировать посредством автотрансплантации кусочков матки. Хирургическую операцию по поводу эндометриоза выполняли, следуя протоколу, первоначально разработанному Vernon and Wilson 1985 (Fertility and Sterility, 1985, Vol.44, pages 684-694). Крыс в диэструсе анестезировали, помещали на грелку-подушку для поддержания температуры тела и выполняли операцию. Выполняли разрез средней линии брюшной полости для раскрытия матки. Четыре кусочка рога матки пришивали вокруг альтернативного каскада брыжеечных артерий, которые питают каудальную часть тонкого кишечника. Послеоперационное восстановление происходило гладко, и регулярная цикличность течки возобновлялась у всех крыс в течение одной недели.

Лечение NAC.

Всех крыс лечили NAC в дозе 60 мг/кг/сутки (когда это применимо, в сутки введения) или плацебо в течение 8 недель после операции. Крыс разделяли в четыре экспериментальные группы:

Первая группа получала импульсное лечение NAC, то есть лечение через день.

Вторая группа получала прерывистое лечение NAC, то есть ежесуточное лечение в течение 5 суток и 2 суток отдыха (то есть 2 суток без лечения).

Третья группа получала ежесуточное лечение NAC.

Четвертая группа получала мнимое лечение, то есть лечение плацебо.

Реакцию избегания для прекращения вагинального растяжения, как описано выше, оценивали через 8 недель.

Результаты

Результаты показывают, что после операции на матке у крыс была индуцирована вагинальная гипералгезия (повышенная чувствительность к боли).

Определяли реакцию избегания (то есть время до ответа и число ответов в течение 15 секунд при определенном объеме растяжения по сравнению с контрольной группой) и вагинальное давление для разных объемов растяжения вагинального канала. Показаны результаты для четырех разных экспериментальных групп (значения для группы мнимого лечения использовали в качестве исходных значений).

Относительное уменьшение реакции избегания при 0,5 мл объеме растяжение относительно группы мнимого лечения составляло:

1. Для группы импульсного лечения NAC: уменьшение реакции избегания на 32%;

2. Для группы прерывистого лечения NAC: уменьшение реакции избегания на 28%;

3. Для группы ежесуточного лечения NAC: уменьшение реакции избегания на 18%.

Примечательно, что результаты, таким образом, показывают, что уменьшающий боль эффект, индуцированный лечением NAC, был более заметным в группе импульсного лечения и в группе прерывистого лечения, по сравнению с группой, которая получала ежесуточное лечение.

1. Способ лечения млекопитающего с эндометриозом, включающий импульсное или прерывистое пероральное введение в течение 3-5 последовательных суток с последующими 2-4 сутками перерыва или в течение 1-3 последовательных суток с последующими 1-2 сутками перерыва фармацевтической композиции, содержащей N-ацетил-L-цистеин, в течение периода времени по меньшей мере два месяца, где N-ацетил-L-цистеин вводят в дозе, составляющей от 20 до 90 мг/кг/сутки в сутки введения.

2. Способ по п. 1, где N-ацетил-L-цистеин вводят в дозе, составляющей от 30 до 60 мг/кг/сутки в сутки введения.

3. Способ по п. 2, где N-ацетил-L-цистеин вводят в дозе, составляющей от 30 до 45 мг/кг/сутки в сутки введения.

4. Способ по п. 1, где фармацевтическая композиция, содержащая N-ацетил-L-цистеин, защищена от света.

5. Способ по п. 1, где фармацевтическая композиция, содержащая N-ацетил-L-цистеин, представляет собой водорастворимую таблетку.

6. Способ по п. 1, где фармацевтическая композиция, содержащая N-ацетил-L-цистеин, содержит гидрокарбонат натрия.

7. Способ по п. 1, где фармацевтическая композиция, содержащая N-ацетил-L-цистеин, содержит полимерное таблеточное покрытие на основе производных целлюлозы или сополимеров сложных аминоэфиров метакрилата, которое обеспечивает высвобождение лекарственного средства в кишечнике.

8. Способ по п. 1, который используют в лечении боли, вызванной эндометриозом.

Группа изобретений относится к медицине и касается стабильной композиции наноструктурированного силденафила, ингибирующей цГМФ-специфичную фосфодиэстеразу типа 5 (PDEV), содержащей наноструктурированное основание силденафила или его фармацевтически приемлемые соли, имеющие средний размер частиц менее чем примерно 500 нм, стабилизатор, где композицию получают в проточном реакторе непрерывного действия на основе микроструйной техники и где композиция обладает полуаморфной структурой. (57) Изобретение относится к области медицины и предназначено для воздействия на микроциркуляцию в костной ткани при экспериментальном остеопорозе и переломах на его фоне. // 2540481

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой офтальмологический раствор, содержащий рибофлавин и витамин Е, для защиты внутренних структур глазного яблока от УФ-А-лучей или для лечения кератоконуса методом трансэпителиального кросс-линкинга.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой сбалансированный инфузионный раствор, содержащий хлориды натрия, калия и магния, растворитель и натрий L-аргинина сукцинат формулы: , причем компоненты в растворе находятся в определенном соотношении в масс.%. Изобретение обеспечивает повышенную детоксицирующую активность, низкую токсичность и широкую область клинического применения. 11 табл., 6пр.

Изобретение относится к способу лечения млекопитающего с эндометриозом. Указанный способ включает импульсное или прерывистое пероральное введение в течение 3-5 последовательных суток с последующими 2-4 сутками перерыва или в течение 1-3 последовательных суток с последующими 1-2 сутками перерыва фармацевтической композиции, содержащей N-ацетил-L-цистеин, в течение периода времени по меньшей мере два месяца. N-ацетил-L-цистеин в указанном способе вводят в дозе, составляющей от 20 до 90 мгкгсутки. Заявленный способ обеспечивает более значительный эффект в отношении симптомов эндометриоза по сравнению с традиционным ежесуточным введением N-ацетил-L-цистеина. 10 з.п. ф-лы, 7 ил., 2 табл., 3 пр.

Фармакологическая группа: муколитические препараты
Систематическое (ИЮПАК) наименование: (2R)- 2-ацетамидо- 3- сульфанилпроновая кислота
Торговые названия: Acetadote, Флуимуцил, Mucomyst, Parvolex
Применение: перорально, инъекционно, ингаляции
Биодоступность 4-10% (пероральная)
Связывание с белками 80-83%
Метаболизм: печень
Период полураспада 5,6 часов
Выделение: почки (22%), фекалии (3%)
Формула C5H9NO3S
Мол. масса 163,195

Ацетилцистеин (АЦЦ / Флуимуцил), также известный как N-ацетилцистеин или N-ацетил-L-цистеин (NАЦ) – фармацевтический препарат и пищевая добавка, используемая в основном в качестве муколитического средства и для лечения передозировки (ацетаминофена). Препарат также применяется при сульфатной насыщенности при таких заболеваниях, как аутизм, при истощении уровней и связанных серосодержащих аминокислот. Ацетилцистеин является производным ; ацетильной группы, которая присоединена к атому азота. Это соединение продается как пищевая добавка, которая, по словам производителей, действует как антиоксидант и защитник печени. Препарат используется в качестве средства от кашля, поскольку он нарушает дисульфидные связи в слизи и разжижает ее, облегчая кашель. Нарушение дисульфидных связей служит истончению запаса аномально густой слизи у пациентов с кистозным и легочным фиброзом. Также известен как: N-ацетил-L-цистеин, NAC, N-Ac
Принимается против:

Зависимости

Не сочетается с:

Активированным углем (так как последний может снизить всасываемость N-ацетилцистеина)

Описание действия Ацетилцистеина (АЦЦ / Флуимуцила)

Ацетилцистеин (АЦЦ / Флуимуцил) – это производное N-ацетиловой натуральной аминокислоты . Вещество обладает очень мощным и быстродействующим муколитическим эффектом. Благодаря свободным сульфгидрильным группам, ацетилцистеин может расщеплять дисульфидные связи в гликопротеиновой слизи с одновременным образованием гидрофильных комплексов, что приводит к сжижению образования и снижению вязкости слизи в бронхиальной секреции. Ацетилцистеин проявляет антиоксидантное действие, нейтрализуя свободные радикалы в воспаленных или гипоксических клетках. Ацетилцистеин действует в качестве антидота при отравлениях или передозировке , поскольку он инактивирует токсичные метаболиты и позволяет поддерживать надлежащий уровень , защищая печень от повреждений. Эффективнее всего ацетилцистеин действует в течение 8 часов после отравления или передозировки; однако описаны случаи эффективности препарата и при отравлении продолжительностью около 36 ч. Ацетилцистеин хорошо всасывается из желудочно-кишечного тракта, достигая максимальной концентрации в дыхательных путях через 0,5-3 ч. Метаболизируется главным образом в печени и выводится с мочой.

Медицинское использование Ацетилцистеина (АЦЦ / Флуимуцила)

Передозировка парацетамола

Внутривенно ацетилцистеин применяется для лечения передозировки (ацетаминофена). При приеме в больших количествах, в организме накапливается минорный метаболит, называемый N-ацетил-пара-бензохинон имин (NAPQI). Обычно он объединяется с , но при чрезмерном применении, запасы в организме оказываются недостаточными для инактивации токсичного NAPQI. Этот метаболит может свободно реагировать с ключевыми печеночными ферментами, повреждая таким образом гепатоциты. Это может привести к серьезным повреждениям печени и даже смерти от острой печеночной недостаточности. Ацетилцистеин действует, увеличивая запасы в организме и, наряду с , непосредственно связываясь с токсичными метаболитами. Эти действия служат для защиты гепатоцитов в печени от токсичности NAPQI. Хотя ацетилцистеин одинаково эффективен как при внутривенном, так и пероральном приеме, при пероральном применении он может плохо переноситься, из-за низкой биодоступности при пероральном введении (поскольку требуется прием очень высоких доз препарата), из-за его очень неприятного вкуса и запаха, и из-за побочных эффектов, особенно тошноты и рвоты. В предыдущих исследованиях фармакокинетики ацетилцистеина ацетилирование не рассматривалось в качестве причины для низкой биодоступности ацетилцистеина. Пероральный ацетилцистеин идентичен по биодоступности прекурсорам . Тем не менее, от 3% до 6% людей, принимающих ацетилцистеин внутривенно, демонстрируют тяжелые аллергические реакция, похожие на анафилаксию, которые могут включать затруднение дыхания (из-за бронхоспазма), снижение артериального давления, сыпь, отек Квинке, а иногда и тошноту и рвоту. Повторные дозы внутривенного ацетилцистеина вызовет прогрессивное ухудшение этих аллергических реакций. Исследования показали, что эти похожие на анафилаксию реакции происходят чаще всего у людей, принимающих ацетилцистеин внутривенно, несмотря на то, что сывороточные уровни недостаточно высоки для того, чтобы считаться токсичными. В некоторых странах не существует никаких специальных внутривенных формул для лечения передозировки . В этих случаях препарат для ингаляции может быть использован внутривенно.

Муколитическая терапия

Ацетилцистеин используют в качестве ингаляции из-за его муколитического действия (растворение слизи) в качестве вспомогательного средства при респираторных заболеваниях с чрезмерной выработкой слизи. Такие заболевания включают эмфизему легких, бронхит, туберкулез, бронхоэктаз, амилоидоз, пневмонию, муковисцидоз, хроническую обструктивную болезнь легких и легочный фиброз. Препарат также используется после операции, для выполнения диагностики и в уходе за больными трахеотомией. Препарат является неэффективным при муковисцидозе. Тем не менее, в недавней работе, опубликованной в Трудах Национальной Академии Наук сообщается, что при пероральном приеме высоких доз ацетилцистеина модулируется воспаление при муковисцидозе, а также что препарат имеет потенциал противостоять дисбалансу окислительно-восстановительного потенциала и воспалительному дисбалансу при муковисцидозе. Пероральный ацетилцистеин может также быть использован в качестве муколитического средства в менее серьезных случаях. Ацетилцистеин действует, уменьшая вязкость слизи путем расщепления дисульфидных связей, связывающих белки, присутствующие в слизи (мукопротеины).

Нефропротективный препарат

Пероральный ацетилцистеин используется для профилактики рентгеноконтрастной нефропатии (формы острой почечной недостаточности). Некоторые исследования показывают, что предварительное введение ацетилцистеина заметно снижает радиоконтрастную нефропатию, в то время как другие ставят его эффективность под сомнение. Был сделан вывод о том, что «N-ацетилцистеин при внутривенном и пероральном приеме может предотвратить нефропатию с дозозависимым эффектом у пациентов с первичной ангиопластикой и может улучшить исход заболевания» «Ацетилцистеин защищает пациентов с умеренной почечной недостаточностью от ухудшения почечной функции после коронарных ангиографических процедур, с минимальными побочными эффектами ». Клиническое исследование 2010 года, однако, показало, что ацетилцистеин является неэффективным средством для профилактики контраст-индуцированной нефропатии. Это исследование с участием 2308 пациентов показало, что ацетилцистеин не имеет преимуществ перед плацебо; вне зависимости от того, использовалась ли ацетилцистеин, или плацебо, заболеваемость нефропатией составляла 13%. Ацетилцистеин по-прежнему широко используется у людей с почечной недостаточностью, чтобы предотвратить развитие острой почечной недостаточности.

Лечение геморрагического цистита, индуцированного приемом циклофосфамида

Ацетилцистеин применяется для лечения геморрагического цистита, индуцированного приемом циклофосфамида, хотя в этом случае обычно более предпочтительно использовать месну, поскольку ацетилцистеин может снижать эффективность циклофосфамида.

Микробиологические использование

Ацетилцистеин может быть использован в методе Петрова, т.е. в сжижении и дезактивации мокроты, при подготовке к диагностике туберкулеза. Он также отображает значительную противовирусную активность против вирусов гриппа А.

Коллагеновая болезнь легкого

Ацетилцистеин используется в лечении интерстициального заболевания легких, чтобы предотвратить развитие болезни.

Психиатрия

Ацетилцистеин успешно используется для лечения множества психических расстройств. В частности, он применяется для лечения шизофрении, биполярного расстройства, трихотилломании, дерматилломании, аутизма, обсессивно-компульсивного расстройствоа, наркотической зависимости (в том числе от никотина, каннабиса, метамфетамина, кокаина и т.д.) и зависимости от азартных игр. Способность ацетилцистеина подавлять p53-индуцированный апоптоз и способствовать аутофагии может быть фактором его эффективности при лечении нервно-психических расстройств.

Синдром поликистозных яичников

В небольшом проспективном исследовании по сравнению ацетилцистеина к метформина (который является стандартным методом лечения СПКЯ), было показано, что оба метода лечения привели к значительному снижению индекса массы тела, гирсутизма, индекса HOMA , уровня свободного тестостерона и нерегулярности менструаций по сравнению с исходными значениями, и обе процедуры имели равную эффективность.

Травматическое повреждение мозга

Было показано, что Ацетилцистеин эффективен при лечении легких и умеренных черепно-мозговых травм, в частности, в снижении потери нейронов, а при снижении когнитивных и неврологических симптомов при введении сразу после травмы.

Ишемия

Ацетилцистеин снижает ущерб, связанный с ишемическим повреждением головного мозга при введении вскоре после инсульта.

Механизм действия Ацетилцистеина (АЦЦ / Флуимуцила)

Ацетилцистеин служит в качестве пролекарства , который является предшественником биологического антиоксиданта, и, следовательно, применение ацетилцистеина пополняет запасы . L-цистеин также, в свою очередь, служит в качестве предшественника цистина, и в качестве субстрата для антипортера цистин-глутамата в астроцитах, тем самым увеличивая высвобождение глутамата во внеклеточное пространство. Этот глутамат, в свою очередь, действует на mGluR2/3 рецепторы, и при более высоких дозах ацетилцистеина, на mGluR5. также модулирует рецептор NMDA, действуя на окислительно-восстановительный участок. Ацетилцистеин также обладает некоторой противовоспалительной активностью, возможно, через ингибирования NF-kB и модуляцию синтеза цитокинов. Он также может способствовать высвобождению дофамина в определенных областях головного мозга.

Комплексообразующий реагент

Химия

Ацетилцистеин является N- ацетиловым производным | |аминокислоты]] , и является предшественником в образовании антиоксиданта в организме. Тиольная (сульфгидрильная) группа обладает антиоксидантным действием и может уменьшать количество свободных радикалов.

Источники и структура

Биологическая значимость

Цистеин является лимитирующим фактором в синтезе глутатиона.

Модификация и формулировки

N-ацетилцистеин похож на L-цистеин (является его ацетилированной формой) и на сам фермент глутатиона (является предшественником синтеза глутатиона); проводились исследования на тему использования L-цистеина и глутатиона в качестве добавки. Глутатион имеет ограниченное терапевтическое использование, так как быстро гидролизуется в кишечном тракте, поэтому повышение уровня глутатиона при пероральном приеме его в виде добавки клинически незначимо.

Фармакология

Сыворотка крови

200-400 мг N-ацетилхолина достигают пика концентрации 350-400 мкг/мл при Tmax – 1-2 часа.

Выведение из организма

До 70% N-ацетилцистеина выводится не с мочой. Основной почечный метаболит N-ацетилцистеина, принятого перорально – мочевой сульфат.

Биоаккумуляция минералов

У грызунов было отмечено снижение накопления в ткани и повышенное выведение свинца с мочой. У людей было отмечено понижение содержания свинца в крови. N-ацетилцистеин обладает хелатирующей активностью. Свинец – тяжелый минерал, обладающий токсическим действием и блокирующий активность глутатиона. Токсическое действие свинца напрямую зависит от истощения запасов глутатиона в клетках; это связано с высокой аффинностью свинца к группе тиолов. Считается, что цистеин (посредством NAC) смягчает токсическое действие свинца, обеспечивая субстратом и понижая взаимодействие свинца с тиоловыми группами. В результате исследований на животных (на основе биомаркеров крови и гистологической экспертизы) было выявлено благоприятное воздействие N-ацетилцистеина против действия свинца на ткани почек, мозга и печени. Считается, что N-ацетилцистеин смягчает токсическое воздействие свинца, который имеет высокое сродство к тиоловым группам, которые обычно подавляют концентрацию глутатиона в организме; положение внешних тиолов может сохранить концентрацию глутатиона. Прием 200-800 мг (доза 400-800 мг разделена на два дня) N-ацетилцистеина в качестве добавки в течение 12 недель рабочими, которые подвержены сильному воздействию свинца, способен сократить концентрацию свинца в крови на 4.72+/-7.08% (дозозависимости не обнаружено). Эритроцитарный липофусцин понижается при приеме N-ацетилцистеина (200-800 мг ежедневно в течение более 12 недель) на 11%. Но это вторичное действие по отношению к снижению токсичности свинца (образует поперечные связи в результате окислительного стресса и повышает липофуцин) . При приеме перорально стандартной дозы способен оказывать защитное действие против токсичности свинца, вероятно, снижает концентрацию свинца в организме и последствия, нанесенные им.

Неврология

Кинетика

N-ацетилцистеин повышает концентрацию глутатиона в нервной ткани грызунов при пероральном приеме, что говорит о том, что NAC способен пересекать гематоэнцефалический барьер. При приеме L-цистеина подобного повышения концентрации глутатиона не наблюдается, так как ацетилирование N-ацетилцистеина замедляет его метаболизм, считается, что пресистемный метаболизм ограничивает распространение цистеина в организме.

Глутаматергическая нейротрансмиссия

Антипорт цистин-глутамат в астроцитах является посредником для синаптических уровней глутамата, а также поглощает цистин (димер цистеина) в обмен на высвобождение глутамата, что включает в себя ингибирующие метаботропные рецепторы глутамата (группа II) на глутаматергических нервных окончаниях и сокращает последующее синаптическое высвобождение глутамата. Считается, что прием N-ацетилцистиена обеспечивает субстратом реакцию, чтобы снизить стимуляцию глутаматергической системы. При приеме лекарственных препаратов антипорт может быть снижен, а его функции нарушены; N-ацетилцистин может приостановить снижение, наблюдаемое при приеме препаратов, и приостановить ауторегуляцию транспортеров. Считается, что цистеин может снизить глутаматергическую нейротрансмиссию, понижая высвобождение нейронов глутамата в синапс (первичное действие – содействие его высвобождению из астроцитов). В процессе исследования кокаинозависимые принимали 2,400 мг N-ацетилцистеина. Показания, снятые через час (посредством МРТ и МРС) продемонстрировали, что высокий уровень глутамата у наркозависимых (который был выше, чем у здоровых людей) нормализовался. Прием N-ацетилцистеина может снизить уровень глутамата (у людей с высоким уровнем) через час после приема. Окисленный и восстановленный глутатион являются лигандом для NMDA- и AMPA-рецепторов. Они подавляют активность лигандов центра связывания глутамата, а также повышают связывание антагониста MK-801 (с NMDA-рецепторами). Влияет на нейротрансмиссию на уровне рецепторов, снижает сигнальную способность лигандов центра связывания глутамата, но повышает связывание антагониста MK-801.

Дофаминергическая нейротрансмиссия

Высвобождение дофамина из нейронов повышается в присутствии низкой концентрации N-ацетилцистеина, но высокая концентрация вещества (10 ммоль) тормозит процесс. Это может быть связано с тем, как глутатион повышает высвобождение дофамина, вызванное глутаматом. Внутривенное введение N-ацетилцистеина замедлило понижение экспрессии дофаминовых транспортеров у обезьян, которым вводился метамфетамин. 3.4. Стресс и чувство тревоги Отмечалось, что в некоторых случаях N-ацетилцистеин оказывал благоприятное воздействие при расстройствах, связанных с тревогой. Например, в результате нескольких тематических исследований был обнаружен благоприятный эффект, который оказывает вещество против кусания ногтей и дерматилломании.

Нервная возбудимость

Было проведено два исследования на пациентах, страдающих аутизмом. Было отмечено, что возбудимость, как симптом аутизма, заметно снижается (по сравнению с действием плацебо) при ежедневном приеме 900-2700 мг вещества и стандартной терапии.

Навязчивое состояние

Были проведены исследования на тему использования N-ацетилцистеина для лечения обсессивно-компульсивного расстройства, так, некоторые участки мозга (прилежащее ядро и прямая поясная кора) демонстрируют схожую реакцию при наркозависимости и ОКР, а прием N-ацетилцистеина, как известно, благоприятно влияет при наркозависимости. У людей, страдающих ОКР, наблюдается повышенное перекисное окисление липидов в головном мозге, связанное с низким уровнем витамина E в мозге и пониженная активность антиоксидантных ферментов (за исключением повышения степени супероксиддисмутазы). Эти окислительные изменения напрямую связаны с утяжелением симптоматики. Сходство между наркозависимостью (доказанное благоприятное воздействие) и ОКР, а также прооксидативные свойства ОКР говорят о том, что прием N-ацетилцистеина может оказать терапевтическое воздействие. Было отмечено, что в мышиной модели ОКР, внутрибрюшное введение150 мг/кг N-ацетилцистеина оказывает благоприятное воздействие (согласно оценке теста защитного зарывания шаров), в то время как доза 50-100 мг/кг оказалась неэффективной. Витамин E также оказался неэффективным при любой дозировке (10-100 мг/кг). Не было отмечено аддитивного эффекта при употреблении N-ацетилцистеина и малой дозы ингибитора обратного захвата серотонина – флувоксамина. Был отмечен благоприятный эффект воздействия ацетилцистеина на животных, причем другой антиоксидант не оказывает того же действия. В ходе исследования было отмечено, что кокаинозависимые имеют повышенный уровень глутамата в мозге, и этот повышенный уровень глутамата связан с импульсивностью; N-ацетилцистеин понижает уровень глутамата, но по окончанию эксперимента степень импульсивности не устанавливалась. Импульсивность связана с высокой церебральной концентрацией глутамата. Проводилось тематическое исследование на пациенте, невосприимчивом к стандартной терапии селективными ингибиторами обратного захвата серотонина (СИОЗС; наблюдается в 20% случаев). После ежедедневного приема 3000 мг N-ацетилцистеина терапия дала результат. В последующем исследовании ежедневный прием 2400 мг N-ацетилцистеина в течение 12 недель пациентами, невосприимчивыми к терапии СИОЗС (и страдающими ОКР), повысил эффективность терапии (более чем на 35% по обсессивно-компульсивной шкале Йеля-Брауна) с 15% до 52,6%. Предварительные данные говорят о том, что N-ацетилцистеин способен усиливать эффективность терапии СИОЗС для лечения ОКР, но неизвестно, может ли N-ацетилцистеин оказывать подобное благоприятное воздействие самостоятельно (так как это скорее вспомогательная терапия, чем монотерапия). Другое заболевание, похожее симптоматикой и методом лечения с ОКР (так как является расстройством импульсного контроля), это трихотилломания, вырывание и поедание волосяного покрова на голове или других частях тела. Существует много видов данного заболевания, некоторые из них походи по симптомам и патологии на ОКР, некоторые – на аддикцию. Поэтому изучается способ применения N-ацетилцистеина для лечения данного заболевания (так как он оказывает благоприятное воздействие при лечении ОКР и аддикции). В ходе тематических исследований было выявлено благоприятное воздействие N-ацетилцистеина при ежедневном приеме 1800 мг и 1200 мг (в одном из исследований) в течение 6 недель с последующим увеличением дозы (2400 мг). Прием вещества показал, что у людей, страдающих трихотилломанией, снижаются общие симптомы (на 31-45%, в зависимости от шкалы оценки), а также симптомы сопутствующих патологий, таких как чувство тревоги (снижение на 31%) и депрессия (снижение на 34%). Предварительные данные говорят о том, что N-ацетилцистеин оказывает благоприятное воздействие при лечении трихотилломании, возможно благодаря эффективному воздействию на лечение аддикции и ОКР (заболевания, схожие по патологии с трихотилломанией).

Аддикция

Во время открытого исследования подростки, которые признались, что употребляют марихуану, перорально принимали 2400 мг (дважды по 1200 мг) N-ацетилцистеина в течение четырех недель. В результате было отмечено ослабление симптомов зависимости (согласно опросу), компульсивности, и эмоциональности, но не тревожного ожидания. Приступы «тяги» к марихуане снизились на 25% (эффект наблюдается спустя 2 недели и сохраняется в последствии), но уровень каннабиоидов в моче остался прежним. Предварительные данные говорят о том, что прием N-ацетилцистеина лишь немного ослабляет зависимость от марихуаны, проявляет антиаддиктивный эффект. Проводилось тестирования на кокаинозависимых, воздерживающихся от употребления наркотиков (по оценке абстинентного синдрома). В течение суток они принимали 2400 мг N-ацетилцистеина (600 мг каждые 6 часов), в результате было отмечено, что спустя два часа после первого приема (пик концентрации NAC в крови) желание не снизилось, но было меньше через 14 часов, эффект сохранился в течение 24 часов после последнего приема лечебного вещества. N-ацетилцистеин может снизить желание к приему кокаина при наркотической абстиненции. В ходе исследования на крысах было отмечено, что самовведение никотина в течение более 21 дня способствует понижению экспрессии GLT-1 и цистин-глутамат антипорта в прилежащем ядре (префронтальная кора и миндалина не затронуты). Результаты эксперимента показали, что прием 2400 мг N-ацетилцистеина в течение 4 недель курильщиками способствовал снижению частоты курения (по сравнению с плацебо) спустя две недели после приема. Потребление никотина может снизить уровень экспрессии цистин-глутамат антипорта и GLT-1, а прием N-ацетилцистеина может оказывать благоприятное воздействие при лечении никотиновой зависимости (снижает количество выкуренных сигарет, но не снижает тяги к курению).

Влияние на сердечно-сосудистое здоровье

Кровь

Ежедневный прием 400-800 мг/кг N-ацетилцистеина в течение 12 недель способствует повышению концентрации глутатиона в эритроцитах на 5-6%, по сравнению с контрольной группой, а также увеличению активности Г6ФД на 17% (по результатам опроса всех групп).

Скелетная мышечная ткань и физическая работоспособность

В результате приема N-ацетилцистеина в течение 6 дней до интервального спринт-теста, который проводился трижды в день, результативность в последующий день сохранялась такой же, но прием вещества не оказывал никакого эффекта при изокинетического тесте; данное исследование продублировано в Pubmed.

Утомление

Прием 150 мг/кг N-ацетилцистеина (путем инъекций) перед повторяющимися пиковыми сокращениями мышц голени не влияет на энергетическую мощность в состоянии покоя, но на 15% повышает по сравнению с контрольной группой, что говорит о противоутомительном действии вещества. Результат был получен посредством низких электрических импульсов (10Hz), которые вводили испытуемых в состояние утомления. В результате интервального спринт-теста было отмечено благоприятное действие N-ацетилцистеина, но не было выявлено никакого эффекта до и после упражнений при изокинетической динамометрии. Хотя N-ацетилцистеин оказывает благоприятное действие против утомляемости, для осуществления такого действия требуются большие дозы, и, следовательно, инъекции; но даже в этом случае действие вещества не ярко выражено.

Влияние на окисление

Глутатион

N-ацетилцистеин действует как субстрат глутатиона. Глутатион (GSH) изолирует реактивные формы кислорода и азота в процессе, который преобразует глутатион (в дисульфид глутатиона; GSSG), затем дисульфид глутатиона восстанавливается до глутатиона с помощью ферментов глутатион-S-трансферазы (ГСТ). Антиоксидантный цикл повторяется, пока глутатион не распадется с помощью гамма-глутамилтрансферазы на свободные глутаматы и дипептид глицин-цистеин. В конечном счете, свободные аминокислоты могут быть использованы для восстановления глутатиона сначала с помощью глутаматцистеин лигазы (чтобы вновь создать дипептид), а затем с помощью синтеза глутатиона (чтобы создать сам глутатион); первый этап – скорость-лимитирующий из-за доступности L-цистеина. Глутатион принимает участие в цикле для блокировки кислородо- и азотосодержащих радикалов, после нескольких циклов он распадается. Глутатион может быть легко восстановлен, но ограничивающим фактором здесь является доступность L-цистеина; прием N-ацетилцистеина позволяет L-цистеину ускорить ресинтез.

Супероксид

Супероксид (O2-) – это анион и свободный радикал, который блокируется антиоксидантным ферментом – супероксиддисмутазой (СОД). N-ацетилцистеин, как и оба цистеина и глутатион, обладают сравнительно низкой скоростью реакции in vitro для блокировки O2-; более того, N-ацетилцистеин проявляет меньше антиоксидантных свойств, чем глутатион, который также довольно неэффективен. N-ацетилцистеин не проявляет защитного воздействия против супероксидов ни напрямую, ни через глутатион.

Перекись водорода

Перекись водорода (H2O2) – это свободный радикал в организме. Он напрямую медленно взаимодействует с N-ацетилцистеином in vitro. N-ацетилцистеин не является перспективным поглотителем свободных радикалов.

Гидроксильная группа

Тиольные антиоксиданты, такие как глутатион и N-ацетилцистеин, достаточно хорошо поглощают гидроксильные радикалы (OH-). N-ацетилцистеин эффективно поглощает гидроксильные радикалы (OH-) как напрямую, так и посредством выработки глутатиона.

Хлорноватистая кислота

Хлорноватистая кислота (HClO) – оксидант, полученный из миелопероксидазы (MPO) после соединения аниона хрорида и перекеси водорода; наибольшая активность фермента проявляется в нейтрофилах (тип иммунных клеток) во время окислительного взрыва. N-ацетилцистеин является достаточно мощным поглотителем HOCl in vitro. N-ацетилцистеин достаточно эффективно блокирует хлорноватистую кислоту.

Воспаление и иммунология

Лейкоциты

Прием 200-800 мг N-ацетилцистеина в течение 12 недель способствовал незначительному понижению активности глутатион-S-трансферазы в лейкоцитах у рабочих, подвергающихся воздействию свинца.

Эозинофилы

Прием 600 мг N-ацетилцистеина в течение 10 недель способствовал понижению уровня катионного белка эозинофилов (который высвобождается при дегранулирования эозинофилов) у лиц с ХОБЛ.

Влияние на органы

Желудок

Прием 600 мг N-ацетицистеина, помимо стандартной терапии, способствует повышению уровня эрадикации у пациентов с инфекцией helicobacter pylori, которые также страдают диспепсией (изжогой), с 60.7% до 70%.

Печень

Впервые о снижении токсического воздействия парацетамола с помощью N-ацетилцистеина было объявлено в 1978 году, при приеме перорально 7 г каждые 216 минут (17 доз).

Почки

Прием N-ацетилцистеина (внутрибрюшные инъекции по 100 мг/кг) способен снизить уровень свинца в крови и тканях крыс (которые предварительно подвергались воздействию свинца в течение 8 недель), что ведет к меньшему повреждению почек.

Легкие

N-ацетилцистеин проявляет муколитические свойства у лиц, страдающих ХОБЛ. N-ацетилцистеин снижает адгезию иммунных клеток при ежедневном приеме в течение 10 месяцев в качестве профилактического вещества, но оказался неэффективным при приеме в течение 8 недель.

Другие заболевания

Хроническая обструктивная болезнь легких

– это заболевание, связанное с ограничением воздушного потока. Болезнь полностью не обратима и связана с патологической воспалительной и окислительной реакцией на стресс-факторы, в частности, в ткани легких. Проводятся исследования на тему благоприятного воздействия ацетилцистеина при ХОБЛ, из-за окислительного и воспалительного характера болезни. При приеме 600 мг N-ацетилцистеина дважды в день был отмечен меньший уровень перекиси водорода в конденсате выдыхаемого воздуха у лиц, страдающих ХОБЛ (на 22% через 15 дней, на 29% через месяц и на 35% через два месяца). Это говорит о более низком уровне окислительного стресса в тканях легких, в особенности от иммунных клеток, таких как активированные нейтрофилы и макрофаги. При приеме плацебо было отмечено повышение H2O2, на функцию легких не было оказано никакого влияния. Понижение уровня перекиси водорода может быть связано с повышением активности глутатионпероксидазы. Ежедневный прием 600 мг N-ацетилцистеина в течение 10 месяцев позволяет сократить адгезию нейтрофилов, при этом прием в течение 8 недель оказался неэффективным. Кортикостероиды имеют обратный эффект, так как они подавляют адгезию на 31% после 8 месяцев приема, но в итоге повышают адгезию спустя 10 месяцев. Понижение адгезии может быть напрямую связано с повышением концентрации глутатиона. Так как ежедневный прием 600 мг N-ацетилцистеина снижает фактор клеточной адгезии ICAM-1 и IL-8, понижение этих двух факторов негативно связано с ростом активности глутатионпероксидазы. Кратковременный прием N-ацетилцистеина может вызвать изменения в дыхательных биомаркерах, что предполагает подавление окислительного стресса в тканях легких. Это говорит о возможности терапевтического использования N-ацетилцистеина при ХОБЛ. Прием 600 мг N-ацетилцистеина дважды в день на протяжении 3 лет (исследование BRONCUS) не снижает темпы ухудшения функции легких. Исследование BRONCUS отметило, что N-ацетилцистеин не оказывает защитное воздействие при приеме кортикостероидов. Это говорит о том, что адъювантная терапия оказалась недейственной. Длительный прием N-ацетилцистина демонстрирует благоприятное воздействие при лечении ХОБЛ, но N-ацетилцистеин не имеет адъювантного свойства при использовании кортикостероидов. Это говорит о том, что благоприятный эффект кортикостероидов схож по действию с эффектом от N-ацетилцистеина, но сочетание двух препаратов улучшает этот эффект. Ежедневный прием 600 мг N-ацетилцистеина в течение одной недели (одновременно с 40 мг преднизолона и 5 мг сальбутамола) не выявил никакого воздействия N-ацетилцистеина на функцию легких или симптомы удушья у лиц, страдающих обостренной формой ХОБЛ. N-ацетилцистеин неэффективен при лечении обостренной формы ХОБЛ.

Аутизм

Связан с повышенной скоростью окисления в мозге, крови и моче. N-ацетилцистеин оказывает терапевтическое действие на людей, страдающих аутизмом, так как это состояние характеризуется низким уровнем глутатиона в мозжечке (34,2%) и височной коре (44,6%), по сравнению со здоровыми людьми. Аутизм также характеризуется генетическими изменениями в пути глутатиона. Кроме того, повышенный уровень глутамата не сильно влияет на патологию аутизма (антагонисты глутамата смягчают симптомы аутизма у животных ). Дополнительное употребление N-ацетилцистеина сокращает уровень повышенного глутамата (механизм, подчеркивающий антиаддикционные свойства). N-ацетилцистин улучшает симптомы аутизма благодаря своим антиоксидативным свойствам, также он снижает чрезмерно высокий уровень глутамата в мозге; и уровень окисления, и уровень глутамата аномально повышены у лиц, страдающих аутизмом, по сравнению со здоровой контрольной группой. Тематическое исследование продемонстрировало многообещающее действие N-ацетилцистеина. В ходе пилотного исследования (двойное слепое) в течение первых 4 недель пациенты ежедневно принимали 900 мг N-ацетилцистеина, двойную дозу (1800 мг) в течение последующих 4 недель, тройную дозу (2700 мг) в течение последних четырех недель. Было обнаружено, что N-ацетилцистеин способен сократить чувство возбудимости (согласно тесту на девиантное поведение) спустя 12 недель у пациентов, страдающих аутизмом, но не воздействует ни на один из параметров по шкале рейтинга аутизма (ABC rating scale), по шкале измерения социальной ответственности (SRS scale) или по шкале искажения ответа (RBS scale). Позднее эксперимент был повторен на лицах, страдающих аутизмом, которые проходят терапию рисперидоном. Ежедневный прием 1200 г вещества в течение 8 недель способствовал снижению чувства возбуждения только по шкале ABC. Предварительные данные говорят о том, что N-ацетилцистеин способен снизить чувство возбуждения у лиц, страдающих аутизмом, особенно при прохождении терапии. Но ни на один другой симптом N-ацетилцистеин не действует.

Синдром Шегрена

В одном исследовании было отмечено, что прием N-ацетилцистеина улучшает глазные симптомы синдрома Шегрена, снижая раздражительность и сухость глаза, а также уменьшает плохой запах изо рта и жажду.

Взаимодействие с питательными веществами

Активированный уголь

Было отмечено, что N-ацетилцистеин связывается с углем в кишечнике (на 96%). В ходе исследований было выявлено, что при совместном потреблении 100 г активированного угля снижают всасываемость N-ацетилцистеина (140 мг/кг) на 39% и понижают пиковые уровни концентрации в плазме крови на 26%. Данное утверждение полностью не подтверждено, так как есть доказательства, говорящие о том, что 60 г активированного угля не влияют на кинетику 140 мг/кг N-ацетилцистеина. Вполне возможно, что N-ацетилцистеин связывается с активированным углем в кишечнике (активированный уголь связывается с токсинами и выводит их из организма). Поэтому не следует использовать оба вещества вместе.

Этиловый спирт

Окислительный стресс обычно оценивается по уровню и активности глутатиона. Совместный прием N-ацетилцистеина и спирта сдерживает понижение уровня глутатиона, вызванное спиртом, спустя 4 недели, и спустя полгода. Также окислительный стресс влияет на печень, кровь и ткани мозга. Крысам до начала опыта вводили этиловый спирт, затем этиловый спирт вводился совместно с N-ацетилцистеином. Спустя 15 дней после начала приема N-ацетилцистеина было отмечено защитное воздействие вещества, так как было выявлено снижение окислительного стресса в печени. Но при приеме N-ацетилцистеина после прекращения приема этилового спирта защитный эффект оказался выше. N-ацетилцистеин за 30 минут до приема дозы этилового спирта демонстрирует защитное действие, в то время как прием N-ацетилцистеина спустя 4 часа после приема этилового спирта усугубляет повреждение. Данное исследование также отметило снижение степени гистологического повреждения у мышей, которые предварительно прошли лечение N-ацетилцистеином. Предварительный прием (за 30 минут) N-ацетилцистеина перед потреблением этилового спирта снижает степень разрушения печени у грызунов, тогда как прием N-ацетилцистеина спустя 4 часа после приема этилового спирта может усугубить повреждения, вызванные спиртом. Биогенез митохондрий у крыс (оценивается по активности гена PGC-1α), усиленный этиловым спиртом, подавляется при приеме 1,7 г/кг N-ацетилцистеина, при этом этиловый спирт снижает структурную целостность и функции митохондрий, независимо от действия N-ацетилцистеина. Исследование, оценивающее митохондриальную структуру тканей печени крыс, выявило, что прием N-ацетилцистеина подавляет усиленный биогенез митохондрий, вызванный этиловым спиртом, но, вероятно, не защищает от других видов повреждений митохондрий; это происходит одновременно со стандартным снижением окислительного повреждения.

Ацетилцистеин (АЦЦ / Флуимуцил): инструкция по применению

Показания к применению

Острый и хронический бронхит и бронхиолит, бронхоэктазы, муковисцидоз, эмфизема и другие респираторные заболевания с большим количеством густой слизи или слизисто-гнойных выделений. В токсикологии применяется в качестве противоядия при передозировке . Применяется также при долгосрочной искусственной вентиляции легких при лечении дыхательной недостаточности, при остром и хроническом синусите, экссудативном среднем отите, а также при подготовке к бронхографии.

Ацетилцистеин (АЦЦ / Флуимуцил): противопоказания

Повышенная чувствительность к любому из компонентов препарата, тяжелый приступ астмы. Не использовать или соблюдать осторожность при применении препарата у пациентов с активной пептической язвой желудка и двенадцатиперстной кишки. Соблюдать осторожность также пожилым пациентам с тяжелой дыхательной недостаточностью, с астмой или с варикозным расширением вен пищевода. Не следует применять пациентам с пониженной способностью к отхаркиванию при отсутствии дыхательной физиотерапии. Большие дозы ацетилцистеина в качестве антидота, могут сократить протромбиновое время, следует контролировать параметры коагуляции. Запах серы не указывает на изменение свойств препарата и является типичным для содержащихся в препарате активных веществ.

Ацетилцистеин (АЦЦ / Флуимуцил): взаимодействие с другими препаратами

Одновременное применение препаратов от кашля может быть связано с удержанием в бронхах разреженной слизи. Одновременное применение с нитроглицерином или нитратами увеличивает их сосудорасширяющее действие и агрегацию тромбоцитов. Не применять препарат в течение двух часов после приема антибиотиков, особенно полусинтетических пенициллинов, тетрациклина, цефалоспоринов и аминогликозидов (при применении ацетилцистеина в качестве антидота эти меры предосторожности являются излишними). Ничего не известно о возможных взаимодействиях ацетилцистеина с амоксициллином, доксициклином, |эритромицином]], тиамфениколом и (ацетилцистеин повышает проникновение в бронхиальную секрецию). Не следует смешивать растворы, содержащие ацетилцистеин, с другими препаратами.

Побочные эффекты Ацетилцистеина (АЦЦ / Флуимуцила)

Тошнота, рвота, изжога, диарея, головная боль, шум в ушах, водянистые выделения из носа, стоматит. Иногда аллергическая реакция проявляется поражением кожи в виде зудящей сыпи. При приеме больших доз может наблюдаться расширение кровеносных сосудов и резкое покраснение лица, а также чрезмерное разжижение слизисто-гнойных выделений (особенно у пациентов с неадекватным кашлевым рефлексом). Очень редко в начальный период применения препарата может наблюдаться бронхоконстрикция, гиперсекреция слизи, резкий сухой кашель. В процессе приема препарата путем ингаляции могут наблюдаться бронхоспазмы и одышка, особенно у пациентов с астмой. Повышенная чувствительность к ацетилцистеину может привести к воспалению слизистой оболочки рта и носа.

Цистеин содержится в большинстве продуктов с высоким содержанием белка, таких как курица, индейка, йогурт, сыр, яйца, семена подсолнечника и бобовые.

Ацетилцистеин (N-ацетил-L-цистеин, NAC) является формой цистеина, используемой в пищевых добавках.

Потребление достаточного количества цистеина и NAC важно по целому ряду причин, касающихся здоровья, включая восполнение самого мощного антиоксиданта в вашем организме – глутатиона. Эти аминокислоты также помогают при хронических респираторных заболеваниях, проблемах с фертильностью и здоровьем мозга.

Вот 9 основных полезных свойств ацетилцистеина (NAC), оптимальная дозировка и потенциальные побочные эффекты от его применения.

Что такое ацетилцистеин, чем он полезен для здоровья и какие побочные эффекты может вызывать

1. Необходим для производства мощного антиоксиданта глутатиона

Ацетилцистеин ценится прежде всего за его роль в производстве антиоксидантов.

Наряду с двумя другими аминокислотами (глутамин и глицин) ацетилцистеин необходим для производства и .

Глутатион является одним из самых важных антиоксидантов, который помогает нейтрализовать свободные радикалы, способные повредить клетки и ткани в вашем организме.

Он важен для иммунного здоровья и борьбы с клеточным повреждением. Некоторые исследователи считают, что он может даже способствовать долголетию ().

Его антиоксидантные свойства также важны для борьбы с многочисленными другими заболеваниями, вызванными окислительным стрессом, такими как сердечно-сосудистые заболевания, бесплодие и некоторые психические расстройства ().

Резюме:

Ацетилцистеин помогает пополнять глутатион – возможно, самый мощный антиоксидант в вашем организме. Благодаря этому он способствует здоровью иммунной системы, увеличению продолжительности жизни и профилактике различных хронических заболеваний.

2. Помогает выводить токсины и предотвращает или уменьшает повреждения почек и печени

Ацетилцистеин играет важную роль в процессе детоксикации вашего организма.

Он может помочь предотвратить побочные эффекты лекарственных средств и воздействие токсинов из окружающей среды ().

Фактически, врачи регулярно вводят внутривенно ацетилцистеин людям с передозировкой парацетамолом для предотвращения или уменьшения повреждения почек и печени ().

Ацетилцистеин также применяется при заболеваниях печени в связи с его антиоксидантными и противовоспалительными свойствами ().

Резюме:

Ацетилцистеин помогает выводить токсины из организма, и может лечить передозировки парацетамола.

3. Может улучшить состояние при психических расстройствах и наркотической зависимости

Ацетилцистеин помогает регулировать уровни глутамата – самого важного нейромедиатора в вашем мозге ().

Хотя глутамат необходим для нормальной работы мозга, избыточное его количество в сочетании с дефицитом глутатиона может вызвать повреждение головного мозга.

Это может способствовать развитию психических расстройств, таких как , шизофрения, обсессивно-компульсивное расстройство (ОКР) и аддиктивное поведение ( , ).

Для людей с биполярным расстройством и депрессией, ацетилцистеин может помочь уменьшить симптомы и улучшить общую способность функционировать. Более того, исследования показывают, что он может играть роль в лечении умеренной и тяжелой формы ОКР ( , ).

Аналогичным образом, исследование на животных показало, что ацетилцистеин может минимизировать отрицательные эффекты шизофрении, такие как социальная изоляция, апатия и уменьшение концентрации внимания ().

Добавки ацетилцистеина также могут помочь уменьшить симптомы отмены и предотвратить рецидив у кокаиновых наркоманов ( , ).

Кроме того, предварительные исследования показывают, что ацетилцистеин может уменьшить употребление марихуаны и никотина, и тягу к ним ( , ).

Многие из этих нарушений имеют ограниченные или в настоящее время неэффективные варианты лечения. Ацетилцистеин может быть эффективной помощью для людей с этими состояниями ().

Резюме:

Регулируя уровни глутамата в вашем мозгу, NAC может облегчить симптомы множества психических расстройств и уменьшить тягу к наркотикам и никотину.

4. Помогает облегчить симптомы респираторных заболеваний

Ацетилцистеин (NAC) может облегчить симптомы респираторных заболеваний, действуя как антиоксидант и муколитическое средство, разжижая слизь в ваших воздушных проходах.

Как антиоксидант, NAC помогает пополнять уровни глутатиона в легких и уменьшает воспаление в ваших бронхах и легочной ткани.

Люди с хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ) испытывают долгосрочное окислительное повреждение и воспаление ткани легких, что заставляет дыхательные пути сжиматься, что приводит к одышке и кашлю.

Добавки ацетилцистеина применяются для облегчения симптомов ХОБЛ и обострений ( , , ).

В однолетнем исследовании 600 мг NAC два раза в день значительно улучшали функцию легких и облегчали симптомы у пациентов со стабильной ХОБЛ ().

Люди с хроническим бронхитом также могут получить пользу от приема ацетилцистеина.

Бронхит возникает, когда слизистые оболочки в ваших бронхиальных проходах легких воспаляются, отекают и закрывают дыхательные пути в легкие ( , ).

Прореживая слизь в ваших бронхах и повышая уровень глутатиона, NAC может помочь уменьшить тяжесть и частоту хрипов и кашля ().

Помимо облегчения ХОБЛ и бронхита, ацетилцистеин может улучшить состояние при других заболеваниях легких и респираторного тракта, таких как муковисцидоз, астма и фиброз легких, а также симптомы заложенности носа и носовых пазух из-за аллергии или инфекций ().

Резюме:

Антиоксидантное свойство и отхаркивающий эффект NAC могут улучшить функцию легких, уменьшая воспаление, а также разжижая слизь.

5. Улучшает здоровье мозга путем регулирования глутамата и пополнения глутатиона

Способность NAC пополнять глутатион и регулировать уровни глутамата в мозге может улучшить здоровье мозга.

Глутамат – нейромедиатор, который участвует в обучении, поведении и памяти, в то время как антиоксидант глутатион помогает уменьшить окислительное повреждение клеток мозга, связанное со старением ().

Поскольку ацетилцистеин помогает регулировать уровень глутамата и пополнять глутатион, он может принести пользу тем, у кого есть проблемы с мозгом и памятью ().

Такое распространенное нейродегенеративное расстройство, как болезнь Альцгеймера, замедляет способность человека к обучению и памяти. Исследования на животных показывают, что NAC может замедлить потерю когнитивной способности у людей с болезнью Альцгеймера ( , ).

Другое заболевание мозга, болезнь Паркинсона, характеризуется повреждением клеток, которые производят нейромедиатор дофамин. Как окислительное повреждение клеток, так и снижение антиоксидантной способности способствуют развитию этого заболевания.

Добавки ацетилцистеина улучшают как функцию дофамина, так и симптомы болезни, такие как тремор ().

В то время как NAC может улучшить здоровье мозга, чтобы сделать серьезные выводы необходимо провести большие исследований с участием человека.

Резюме:

Помогая пополнять антиоксидант глутатион и регулируя глутамат, NAC может потенциально лечить такие болезни, как болезни Альцгеймера и Паркинсона.

6. Может улучшить фертильность как у мужчин, так и у женщин

Приблизительно 15% всех пар, пытающихся завести ребенка, страдают от бесплодия. Почти в половине случаев мужское бесплодие является основным фактором ().

Многие проблемы мужского бесплодия возрастают, когда уровень антиоксидантов недостаточен для борьбы с образованием свободных радикалов в вашей репродуктивной системе. Окислительный стресс может привести к гибели клеток и снижению фертильности ().

В некоторых случаях ацетилцистеин продемонстрировал способность улучшать мужскую фертильность.

Одним из заболеваний, которые способствуют мужскому бесплодию, является варикоцеле – когда вены внутри мошонки становятся увеличенными из-за повреждения свободными радикалами. Хирургия – основной вид лечения.

В одном исследовании 35 мужчин с варикоцеле получали 600 мг NAC в день в течение трех месяцев после операции. Комбинация хирургии и добавок NAC улучшила целостность спермы и вероятность беременности партнера на 22% по сравнению с контрольной группой ().

Другое исследование с участием 468 мужчин с бесплодием показало, что прием 600 мг NAC и 200 мкг в течение 26 недель улучшал качество спермы ().

Исследователи предположили, что комбинирование этих добавок следует рассматривать в качестве варианта лечения мужского бесплодия.

Кроме того, ацетилцистеин может улучшить фертильность у женщин с синдромом поликистозных яичников (СПКЯ) путем индукции или увеличения цикла овуляции ().

Резюме:

NAC может помочь улучшить фертильность у мужчин за счет снижения окислительного стресса, который наносит ущерб или убивает репродуктивные клетки. Он также может помочь фертильности у женщин с СПКЯ.

7. Может стабилизировать уровень сахара в крови, уменьшая воспаление в жировых клетках

Высокий уровень сахара в крови и ожирение способствуют воспалению в жировой ткани.

Это может привести к повреждению или разрушению рецепторов инсулина и подвергнуть вас более высокому риску развития сахарного диабета 2 типа ().

Исследования на животных показывают, что NAC может стабилизировать уровень сахара в крови, уменьшая воспаление в жировых клетках, тем самым улучшая резистентность к инсулину ( , ).

Когда инсулиновые рецепторы целы и здоровы, они правильно удаляют сахар из крови, сохраняя уровни в нормальных пределах.

Однако имейте в виду, что для подтверждения этих эффектов в отношение контроля уровня сахара в крови необходимы исследования ацетилцистеина с участием человека.

Резюме:

Уменьшая воспаление в жировой ткани, NAC может снизить резистентность к инсулину и улучшить регуляцию сахара в крови, но человеческих исследований не хватает.

8. Может снизить риск сердечно-сосудистых заболеваний, предотвращая окислительное повреждение

Окислительное повреждение сердечной ткани часто приводит к заболеваниям сердца, вызывая инсульты, инфаркты и другие серьезные состояния.

NAC может снизить риск развития сердечно-сосудистых заболеваний путем уменьшения окислительного повреждения тканей в вашем сердце ().

Было также выявлено, что ацетилцистеин способствует увеличению производства оксида азота, который улучшает способность вен расширяться и приводит к улучшению кровообращения. Это ускоряет транзит крови обратно к вашему сердцу, и может снизить риск сердечных приступов ().

Исследование в пробирках показало, что в сочетании с , NAC, по-видимому, уменьшает повреждение от окисленного «плохого» холестерина ЛПНП – еще один фактор риска, влияющий на развитие сердечно-сосудистых заболеваний ().

Резюме:

NAC может уменьшить окислительное повреждение в вашем сердце, что, в свою очередь, может снизить риск развития сердечных заболеваний.

9. Способность повышать уровень глутатиона может улучшить иммунную функцию

Ацетилцистеин и глутатион также повышают иммунитет.

Исследования некоторых заболеваний, связанных с дефицитом NAC и глутатиона, свидетельствуют о том, что иммунная функция может быть улучшена и, возможно, восстановлена, путем приема добавок NAC ().

В двух исследованиях прием добавок NAC привел к значительному увеличению иммунной функции при почти полном восстановлении естественных клеток киллеров ( , , ).

Исследование в пробирке показало, что при ослабленном иммунитете во время гриппа, NAC может препятствовать способности вируса к репликации. Это может потенциально уменьшить симптомы и продолжительность болезни ().

Аналогичным образом, другие исследования в пробирках связывали ацетилцистеин с гибелью раковых клеток и блокировкой репликации раковых клеток ( , ).

В целом, необходимо провести больше исследований на человеке. Поэтому, прежде чем принимать ацетилцистеин во время лечения рака обязательно поговорите со своим врачом ().

Резюме:

Способность NAC повышать уровни глутатиона может улучшить иммунную функцию при различных заболеваниях.

Яйца, и бобовые, содержат цистеин, некоторые люди чтобы увеличить потребление цистеина предпочитают принимать добавки NAC.

Ацетилцистеин имеет низкую биодоступность в качестве пероральных добавок, что означает, что он плохо усваивается. Принятая ежедневная рекомендация относительно дозировки составляет 600-1800 мг NAC ( , ).

NAC можно вводить внутривенно или принимать перорально в виде спрея, в виде жидкости или порошка.

Резюме:

Употребление высокобелковых продуктов может обеспечить ваш организм аминокислотой цистеином, но ацетилцистеин также можно принимать в качестве добавки, чтобы помочь лечить определенные заболевания.

Побочные эффекты

Ацетилцистеин, вероятно, безопасен для взрослых, когда он принимается в рекомендуемых дозировках.

Однако высокие количества могут вызывать тошноту, рвоту, диарею и запор ().

При вдыхании он может вызвать отек во рту, насморк, сонливость и стеснение в груди.

Люди с нарушениями свертываемости крови или люди, принимающие разжижающие кровь препараты не должны принимать NAC, так как это может замедлить свертывание крови ().

Ацетилцистеин имеет неприятный запах, который затрудняет его потребление. Если вы решите его принимать, сначала проконсультируйтесь с врачом.

Резюме:

В то время как NAC считается безопасным препаратом, он может вызвать тошноту, рвоту, желудочно-кишечные расстройства при приеме в больших количествах, а также отек во рту и другие симптомы при вдыхании.

Подведем итог

• Ацетилцистеин играет несколько важных ролей в здоровье человека.
• Известный своей способностью пополнять уровни антиоксиданта глутатиона, он также регулирует важный нейромедиатор глутамат. Кроме того, NAC помогает системе детоксикации организма.
• Эти функции делают ацетилцистеин потенциальным лекарственным средством для лечения множества проблем со здоровьем.
• Проконсультируйтесь с вашим врачом, чтобы узнать, может ли NAC улучшить ваше здоровье.

, сахарин , сахароза , ароматизатор .

Каждый пакет порошка помимо главного вещества содержит вкусоароматическую добавку «Ароматик» Лимон , лактозы моногидрат , .

Форма выпуска

Лекарство выпускают в виде раствора для внутреннего применения или капсул. Кроме того, известна такая форма выпуска, как шипучие таблетки.

Фармакологическое действие

Муколитическое действие.

Фармакодинамика и фармакокинетика

Про ацетилцистеин , что это такое и каков механизм его действия, важно знать перед применением препарата. Он представляет собой производное аминокислоты цистеина . Действие препарата Ацетилцистеин обусловлено тем, что его сульфгидрильная группа расщепляет дисульфидные связи кислых мукополисахаридов мокроты . Это и вызывает муколитическое действие. Мукорегуляторная активность зависит от повышения секреции менее вязких сиаломуцинов бокаловидными клетками . На эпителиальных клетках слизистой бронхов адгезия бактерий снижается. Это происходит из-за уменьшения вязкости мокроты и повышения мукоцилиарного клиренса .

Обеззараживающий эффект препарата обусловлен действием свободной сульфгидрильной группы, которая влияет на электрофильные окислительные токсины , нейтрализуя их.

Данное лекарственное средство защищает клетки от свободных радикалов как посредством прямого взаимодействия с ними, так и за счет транспортировки цистеина для синтеза .

Препарат быстро расщепляется при внутреннем применении. Но его биодоступность – приблизительно 10%. Степень связи с белками плазмы – 50%. Максимальная концентрация в при этом наблюдается через 60-180 минут. Действующее вещество может поступать через плацентарный барьер и скапливаться в околоплодной жидкости. Время полувыведения – 60 минут. При – до 8 часов.

Экскретируется в основном почками в качестве неактивных . Некоторая часть в неизменном виде выводится кишечником. В плазме определяется в неизменном виде, а также как метаболит N-ацетилцистеин , эфир цистеина и N,N-диацетилцистеин .

Показания к применению

Лекарство применяется при затрудненном отделении мокроты , легкого , катаральном и гнойном отите , удалении вязкого секрета из дыхательных путей после операций, а также в случае посттравматических состояний. Кроме того, среди его показаний значатся интерстициальные заболевания легких , муковисцидоз , легких , отравление .

Противопоказания

Нельзя использовать данное средство при обострении , легочном , гиперчувствительности к препарату, кровохаркании , .

Побочные действия

Препарат может привести к появлению таких побочных реакций, как:

• сыпь, бронхоспазм ;
• тошнота, стоматит , рвота, ощущение переполненного желудка;

В редких случаях возможен шум в ушах, жжение на месте введения (в случае использования раствора), а также рефлекторный кашель, ринорея и местное раздражение дыхательных путей при ингаляционном применении.

Инструкция по применению Ацетилцистеина (Способ и дозировка)

Дозировки подбираются в зависимости от возраста и характера заболевания пациента.

Инструкция по применению Ацетилцистеина сообщает, что для детей 2–6 лет обычно показана суточная дозировка в 100 мг 3 раза или в 200 мг 2 раза. Лекарство применяется в форме водорастворимого гранулята. А для детей до 2 лет назначается суточный прием 2 раза по 100 мг. В свою очередь, детям 6-14 лет дают ежедневно 2 раза по 200 мг, в случае муковисцидоза – 200 мг 3 раза. Лекарство может приниматься в виде шипучих таблеток, капсул или гранулята.

Взрослые принимают каждый день по 200 мг препарата 2-3 раза в любых возможных формах выпуска.

Для аэрозольной терапии распыляется 20 мл раствора 10% в ультразвуковых приборах, а в приборах с распределительным клапаном распыляется 6 мл раствора 10%. Ингаляцию делают каждый день 15-20 минут 2-4 раза. При острых состояниях терапия составляет 5-10 дней, при хронических – до полугода.

При сильном секретолитическом действии необходимо отсосать секрет , а также снизить частоту применения и дозировку препарата.

Передозировка

Лекарство при передозировке может вызвать , тошноту, болезненные ощущения в животе, рвоту.

Catad_tema Болезни органов дыхания - статьи

Перспективные направления клинического применения N-ацетилцистеина

В.В. Деньгин
Москва

В клинической практике N-ацетилцистеин (N-АЦ) традиционно применяют в качестве отхаркивающего и противовоспалительного препарата. В последние годы выявлены новые механизмы антиоксидантного, глутатион-заместительного, детоксицирующего действия N-АЦ. Это позволило использовать его для лечения интоксикаций (ацетаминофеном, свинцом и т. д.), профилактики и терапии артериальной гипертензии, атеросклероза, токсических реакций на введение рентгеноконтрастных веществ и химиотерапию. В созданном ВОЗ реестре клинических испытаний эффективность N-АЦ изучают преимущественно при контраст-индуцированной нефропатии, кардиохирургических вмешательствах, лечении хронической обструктивной болезни легких, интоксикаций, онкологических заболеваний, сахарного диабета.

N-ацетилцистеин (N-АЦ) используют в клинической практике уже несколько десятков лет, причем в последние годы спектр показаний к его примененению расширяется и помимо традиционных – в качестве отхаркивающего и противовоспалительного препарата – включает новые направления, связанные с антиоксидантным и детоксицирующим действиями.

Среди клинических испытаний N-АЦ, зарегистрированных в реестре ВОЗ , почти треть посвящена применению препарата для профилактики контраст-индуцированной нефропатии – КИН (см. таблицу), в основном при различных кардиохирургических вмешательствах и манипуляциях на периферических артериях, проводимых в т. ч. и на фоне почечной недостаточности. Препарат применяют также при лечении собственно почечной недостаточности (10 % исследований), причем как на додиализной стадии, так и при диализе. В целом нефрологические аспекты выявлены почти в половине всех исследований. Использованию N-АЦ в пульмонологии посвящена только восьмая часть зарегистрированных в реестре исследований, в основном – его традиционному применению при бронхитах; препарат испытывают также при фиброзирующем альвеолите и для лечения ночного апноэ. Кроме того, активно изучают возможность использования N-АЦ при широком спектре интоксикаций (суммарно 16 % исследований), в онкологии, эндокринологии, психиатрии, акушерстве, при инфекциях.

Таблица Направления клинических испытаний N-АЦ

Тема исследований	N (%)
Контраст-индуцированная нефропатия, в т. ч.:	19 (32)
- аортокоронарное шунтирование	4
- профилактика острой почечной недостаточности	1
- профилактика хронической почечной недостаточности	1
- кардиохирургические вмешательства без уточнения	5
- катетеризация сердца	2
- периферическая ангиография	3
Пульмонология, в т. ч.:	7 (12)
- фиброзирующий альвеолит	1
- хроническая обструктивная болезнь легких	3
- ночное апноэ	1
- бронхит	2
Хроническая почечная недостаточность	6 (10)
Интоксикация лекарствами, в т. ч.:	5 (8)
- ацетаминофен	1
- антагонисты N-метил-D-аспартат (NMDA) рецепторов	1
- аминогликозиды	1
- противотуберкулезные препараты	1
Интоксикация другими веществами, в т.ч.:	5 (8)
- алкоголем	1
- частицами дизельного выхлопа	1
- кокаином	1
Онкология	4 (7)
Сахарный диабет	4 (7)
Наследственные заболевания	2 (3)
Острая печеночная недостаточность	2 (3)
Психиатрия	2 (3)
Акушерство	2 (3)
Гипербарическая оксигенация	1 (2)
Малярия	1 (2)
Итого	59 (100)

Столь широкий диапазон применения N-АЦ обоснован новыми патофизиологическими данными о механизмах действия этого препарата.

Новые механизмы действия N-АЦ

N-АЦ – производное незаменимой серосодержащей аминокислоты метионина, входящей в состав ряда пищевых продуктов (например, животного белка и бобовых). Главная функция метионина в организме – служить основным источником сульфгидрильных групп, входящих в состав цистеина. Эти группы разрушают активные формы кислорода (АФК), вызывающие большое количество повреждений. Цистеин поступает в клетки с помощью нескольких высокоактивных АТФ-зависимых переносчиков; особенно много их в клетках печени, кишечника, канальцев почек (поэтому при снижении содержания цистеина эти органы страдают в первую очередь).

Потребность организма здорового взрослого человека в метионине составляет 1,1 г/сут , она повышена у детей и, как предполагают, у пожилых. Однако одно из производных метио-нина – гомоцистеин – способствует развитию атеросклероза, поэтому увеличение суточного потребления метионина у пожилых может оказаться нежелательным .

В то же время N-АЦ хорошо всасывается и легко проникает в клетки (после приема внутрь в клетках оказывается практически 90 % вещества ). Терапевтический диапазон N-АЦ достаточно широк: в эксперименте на крысах токсического действия не вызывало назначение даже 1000 мг/кг препарата (что соответствует дозе 70 г/сут для человека весом 70 кг) . Внутривенное введение N-АЦ здоровым добровольцам в дозе 160 мг/кг (11 г/сут для человека весом 70 кг) несколько снижало содержание витамин К-зависимых факторов свертывания, однако свертывание крови при этом не нарушалось . Тем не менее при кровотечениях N-АЦ назначать не рекомендуют. В клинических условиях прием высоких доз препарата приводил в основном к желудочно-кишечным расстройствам, в редких случаях - к появлению высыпаний; внутривенное введение (в дозах до 150 мг/кг в течение 15 минут) сопровождалось появлением отеков и тахикардии . В одном наблюдении при ошибочном введении препарата в дозе 2450 мг/кг развился эпилептический припадок и пациент погиб .

В цитоплазме клеток из цистеина (или N-АЦ), глутамата и глицина син-теризуется трипептид глутатион, причем скорость этого процесса зависит именно от поступления цистеина. Содержание глутатиона в клетке в сотни раз выше, чем цистеина; наиболее высоко оно в клетках печени и кишечника. Глутатион синтезируется в цитоплазме, и для его переноса в органеллы с наиболее активным уровнем окислительных процессов (а значит, и образования АФК) – митохондрии – также требуется переносчик и расходуется АТФ (рис. 1). N-АЦ проникает в митохондрии легче, поэтому его преимущества наиболее ярко проявляются в клетках, где транспортные системы работают с высокой нагрузкой и в первую очередь страдают при патологических процессах, например в клетках канальцев почек.

Рис. 1. Роль N-ацетилцистеина в синтезе глутатиона (GSH)

Основная функция глутатиона – инактивировать АФК в реакции восстановления, и при ее нарушении развивается повреждающий клетку оксидантный стресс. Процессы восстановления/окисления глутатиона являются ферментативными, причем на них оказывают влияние АФК, многие токсические вещества, дефицит селена (необходимого для функционирования фермента глутатионпероксидазы). N-АЦ также содержит SH-группу и способен инактивировать АФК, поэтому его применение обеспечивает помимо восполнения дефицита глутатиона и непосредственное антиоксидантное действие (рис. 2).

Рис. 2. Механизмы оксидантного стресса и протективные эффекты N-ацетилцистеина

Примечание. GSH/GSSH - восстановленный/окисленный глутатион; АФК - активные формы кислорода (Н 2 0 2 , О۫, 0 2 -); МДА - малоновый диальдегид (продукт перекисного окисления липидов); ЛПНП - липопротеины низкой плотности; Апо(а) - аполипопротеин а; Лп(а) - липопротеин а; N0 - нитроксид; РААС - ренин-ангиотензин-альдостероновая система; СНС - симпатическая нервная система; АГ - артериальная гипертония; ↓ - подавление/активация под влиянием N-АЦ.

Нарушение инактивации АФК приводит к разнообразным последствиям.

В частности, оно вызывает перекисное окисление липидов мембран, в результате чего эти мембраны разрушаются (при этом образуется малоновый диальдегид, содержание которого можно определить в плазме и моче) и клетки погибают. Наиболее значимы эти процессы для тканей с высоким содержанием липидов, например тканей головного мозга и печени; в то же время показано, что введение N-АЦ снижает образование малонового диальдегида и клетки живут дольше .

Неблагоприятное действие АФК усиливается, если они действуют сочетанно с другими повреждающими факторами, как происходит при многих интоксикациях, например тяжелыми металлами (свинцом, кадмием, мышьяком) . Все эти металлы вызывают оксидантный стресс, а их длительное воздействие приводит к образованию опухолей кожи, легких, почек. Показано, что терапия N-АЦ способствует их более активному выведению, причем при острой интоксикации кадмием N-АЦ в сочетании со специфическим антидотом действовал статистически значимо активнее, чем цистеин .

Под влиянием АФК липопротеины низкой плотности (ЛПНП) окисляются и связываются с гликопротеином апо (а), образуя липопротеин (а); макрофаги сосудистой стенки поглощают окисленные ЛПНП и липопротеин (а), в результате чего формируются атеросклеротические бляшки. Показано, что N-АЦ предотвращает окисление ЛПНП, разрывает дисульфидные связи в молекуле липопротеина (а) и тем самым расщепляет и инактивирует его. Более того, из всех пищевых веществ именно N-АЦ наиболее активно способствует снижению уровня липопротеина (а), уменьшая его почти на 70 % . Следует отметить, что введение N-АЦ способствует повышению уровня NO. Все эти факты стали одной из причин активного изучения N-АЦ в кардиологии в последние годы.

Клинические испытания и применение N-АЦ

КИН считается третьей по частоте причиной острой почечной недостаточности у госпитализированных пациентов, причем механизм ее развития включает как непосредственное токсическое повреждение клеток канальцев почек, так и преходящую вазоконстрикцию. Особенно часто это поражение развивается при чрескожных коронарных вмешательствах при остром инфаркте миокарда. Это делает вполне обоснованным проведение в данной ситуации клинических испытаний N-АЦ. В проспективном исследовании препарата у 354 больных в первые 12 часов развития инфаркта миокарда с подъемом сегмента ST (средний возраст – 62 ± 12 лет; 80 % мужчины) N-АЦ назначали в стандартной (600 мг внутривенно струйно перед вмешательством и по 600 мг внутрь 2 раза в сутки в течение 48 часов, общая доза – 3000 мг; n = 115) или высокой дозе (1200 мг внутривенно струйно, затем внутрь по 1200 мг 2 раза в сутки в те же сроки, общая доза – 6000 мг; n = 118). Пациентам контрольной группы (n = 119) рандомизированно назначали плацебо .

Частота развития КИН составила в целом 19 %; независимыми факторами ее риска были исходные скорость клубочковой фильтрации почек ≤ 60 мл/мин и фракция выброса сердца ≤ 40 %. Отношение шансов развития КИН в контрольной группе по сравнению с группами N-АЦ составило: 2,60 – для стандартной (р = 0,007) и 5,78 – для высокой доз препарата (р Среди традиционных областей клинического применения N-АЦ остается хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ). В 1997–2005 гг. в Европе было проведено крупное исследование BRONCUS с участием 523 пациентов с ХОБЛ, связанным с курением . Больным рандомизированно назначали N-АЦ по 600 мг/сут (n = 256) или плацебо (n = 267). Определяли динамику снижения объема форсированного выдоха за 1 секунду (ОФВ1) и частоту обострений заболевания, дополнительно оценивали качество жизни. Большинство больных выбыли из исследования преждевременно, причинами отказа от терапии были несоблюдение режима приема препарата и развитие побочных эффектов (чаще – в группе плацебо). В целом длительный прием N-АЦ в дозе по 600 мг/сут не изменял динамики снижения ОФВ1 и жизненной емкости легких, не влиял на частоту обострения ХОБЛ и качество жизни больных. Отмечены тенденции к терапевтическому эффекту терапии препаратом у пациентов, не принимавших ингаляционные стероиды, а также к уменьшению выраженности эмфиземы легких. В более ранних работах не было продемонстрировано положительного влияния N-АЦ при лечении обострений ХОБЛ (добавление к терапии стероидами и бронходилаторами) . Следует, однако, отметить, что препарат применяли в невысоких дозах, а в недавно вышедшей Стратегии диагностики, лечения и профилактики ХОБЛ (GOLD, 2006) данные об эффективности N-АЦ отнесены к группе доказательности В и подчеркивается его эффективность у пациентов, не получавших ингаляционные стероиды.

При идиопатическом фиброзирующем альвеолите, сопровождавшемся активным воспалением в интерстиции легких с активацией выработки АФК, приводящим к фиброзу, применение N-АЦ изучали в крупном рандомизированном многоцентровом исследовании IFIGENIA (Idiopathic Pulmonary Fibrosis International Group Exploring N-Acetylcysteine I Annual) . В исследовании участвовали 182 больных, получавших стандартную терапию преднизолоном и азатиоприном, которым рандомизированно назначали N-АЦ по 600 мг 3 раза в сутки (n = 92) или плацебо (n = 90). Через 12 месяцев лечения N-АЦ отмечено достоверное повышение жизненной емкости легких на 0,18 л (при 95 % доверительном интервале от 0,03 до 0,32), или на 9 % (p = 0,02), а также диффузионной способности легких на 0,75 ммоль/мин/кПа (при 95 % доверительном интервале от 0,27 до 1,23; p = 0,0003) по сравнению с плацебо. За время наблюдения исследователи не отметили различий между группами по смертности.

В отношении развития нежелательных эффектов значимых различий также не отмечено, за исключением миелотоксического действия высоких доз N-АЦ (p = 0,03). При этом авторы подчеркивают, что статистическая мощность исследования для оценки влияния N-АЦ на клинические конечные точки была недостаточной, а обнаруженное влияние на показатели прогрессирования заболевания позволяет рекомендовать его применение в составе комбинированной терапии идиопатического фиброзирующего альвеолита. Клинически сходно с идиопатическим фиброзирующим альвеолитом протекает редкий наследственный синдром Хермански–Пудлака (Hermansky–Pudlak); для его лечения N-АЦ предложено применять не в качестве монотерапии (оказавшейся малоэффективной), а в составе комбинированного лечения. В настоящее время начато исследование сочетания терапии N-АЦ с правастатином, лозартаном, зилеутоном, эритромицином . Авторы исследования предлагают проводить терапию фиброзирующего альвеолита с применением многокомпонентных лекарственных схем, аналогично тому, как это делается при лечении онкологических заболеваний.

N-АЦ применяют также при интоксикации различными веществами: парацетамолом, паракватом, четырех-хлористым углеродом, хлороформом, моноксидом углерода, этиловым спиртом; а также для уменьшения побочных эффектов ряда лекарственных препаратов (доксорубицина, вальпро-евой кислоты, ифосфамида, цисплатина). Наиболее убедительные данные об эффективности N-АЦ, подтвержденные в клинических испытаниях, получены в отношении терапии отравления парацетамолом. При интоксикации парацетамол на 90 % метаболизируется в печени системой цитохрома Р450, функционирование которой сопровождается образованием большого количества АФК. Активация этой системы приводит к быстрому истощению в печени запасов глутатиона, что вызывает цитолиз гепатоцитов. N-АЦ инактивирует АФК, стимулирует образование глутатиона, а возможно, и непосредственно метаболизирует парацетамол. Этим может объясняться наибольшая эффективность препарата при введении в первые 8 часов после отравления. Препарат рекомендуют вводить в дозе 140 мг/кг внутрь однократно, затем по 70 мг/кг внутрь каждые 4 часа до 17 раз либо внутривенно до 2400 мг/сут. В США N-АЦ внутривенно вводить не принято, хотя это безопасно и эффективно .

В целом при мета-анализе 46 плацебо-контролируемых клинических испытаний N-АЦ при приеме внутрь выявлено, что он оказывал положительное действие в отношении конечных критериев оценки и/или качества жизни пациента в двух третях исследований . Это позволяет надеяться, что в ближайшие годы спектр областей клинического применения N-ацетилцистеина значительно расширится.

ЛИТЕРАТУРА
1. http://www.who.int/trialsearch
2. Rose WC. Amino acid requirements of man. Nutr Rev 1976;34:307–09.
3. van de Poll MCG, Dejong CHC, Soeters PB. Adequate Range for Sulfur-Containing Amino Acids and Biomarkers for Their Excess: Lessons from Enteral and Parenteral Nutrition. J Nutr 2006;136:1694S–1700S.
4. Passwater RA. N-Acetylcysteine (NAC): An Old Nutrient Attracts New Research. healthy.net/scr/Article.asp
5. Bonanomi L, Gazzaniga A. Toxicological, phar-macokinetics and metabolic studies onacetylcy-steine. Eur J Respir Dis 1980;61(Suppl.):45–51.
6. Knudsen TT, Thorsen S, Jensen SA, et al. Effect of intravenous N-acetylcysteine infusion on haemostatic parameters in healthy subjects. Gut 2005;54:515–21.
7. Cooper M. AIDS – Drug therapy; Acetylcysteine research. CDC AIDS Weekly p4 (Oct. 2, 1989).
8. Bailey B, Blais R, Letarte A. Status epilepticus after a massive intravenous N-acetylcysteine overdose leading to intracranial hypertension and death. Ann Emerg Med 2004;44:401–06.
9. Neal R, Yang P, Fiechtl J, et al. Pro-oxidant effects of delta-aminolevulinic acid (delta-ALA) on Chinese hamster ovary (CHO) cells. Toxicol Lett 1997;91:169–78.
10. Lyn P. Toxic Metals and Antioxidants: Part II. The Role of Antioxidants in Arsenic and Cadmium To-xicity. Altern Med Rev 2003;8(2):106–28.
11. Tandon SK, Prasad S, Singh S. Chelation in metal intoxication: influence of cysteine or Nacetyl cy-steine on the efficacy of 2,3-dimercaptopro-pane-1-sulphonate in the treatment of cadmium toxicity. J Appl Toxicol 2002;22:67–71.
12. Мухин Н.А., Балкаров И.М., Шоничев Д.Г. и др. Формирование артериальной гипертонии при уратном тубулоинтерстициальном поражении почек. Терапевтический архив. 1999. № 6. С. 23–27.
13. Stalenhoef AFH, et al. N-acetylcysteine and lipo-protein. Lancet 1991;337:491.
14. Marenzi G, Assanelli E, Marana I, et al. N-Acetylcy-steine and Contrast-Induced Nephropathy in Primary Angioplasty. N Engl J Med 2006;354: 2773–82.
15. Decramer M, Rutten-van Muelken M, Dekhuij-zen PNR, et al. Effects of N-acetylcysteine on outcomes in chronic obstructive pulmonary disease (Bronchitis Randomized on NAC Cost-Utility Study, BRONCUS): a randomised placebocon-trolled Trial. Lancet 2005;365:1552–60.
16. Black PN, Morgan-Day A, McMillan TE, et al. Randomised, controlled trial of N-acetylcysteine for treatment of acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease . BMC Pulm Med 2004;4:13.
17. Demedts M, et al. High-Dose Acetylcysteine in Idiopathic Pulmonary Fibrosis. N Engl J Med 2005;353:2229–42.
18. Pilot Study of a Multi-Drug Regimen for Severe Pulmonary Fibrosis in Hermansky-Pudlak Syndrome. ClinicalTrials.gov identifier: NCT00467831.
19. Polin RA, Ditmar MF. Pediatric Secrets, 3rd Edition. Hanley & Belfus. 2001;5:119.
20. Atkuria KR, Mantovania JJ, Herzenberga LA, Herzenberg LA. N-Acetylcysteine – a safe antidote for cysteine/glutathione deficiency. Curr Opin Pharmacol 2007;7(4):355–59.